24小时热门版块排行榜    

查看: 3205  |  回复: 52
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】怎么做都提不出DNA,请高手帮一下忙喽!!!! 已有23人参与

怎么做都提不出DNA,请高手帮一下忙喽!!!!
我是从青霉菌里提的,开始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后,12000离心10min,加两次氯仿:异戊醇(24:1)后离心10Min,12000收集上清,加等体积异丙醇-20放置30min以上,13500离心,用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的,结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法,(液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄,50℃,1h)做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了,结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下!!!

[ Last edited by 1949stone on 2011-4-21 at 12:54 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1): yes 2011-03-30 08:20:04
1949stone(金币+2): 白菜也好贵啊 2011-04-21 12:55:21
直接用kit提……现在提DNA的试剂盒都白菜价了
9楼2011-03-29 22:24:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 53 个回答

zmw_520

禁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 有理 2011-04-21 12:53:50
本帖内容被屏蔽

2楼2011-03-28 20:00:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河外生命

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 支持楼上 2011-04-21 12:54:04
说下实验细节,好让大家帮你分析
事在人为
3楼2011-03-28 21:39:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 鬼笔坏坏 at 2011-03-28 18:52:28:

回复:我是从青霉菌里提的,开始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后,12000离心10min,加两次氯仿:异戊醇(24:1)后离心10Min,12000收集上清,加等体积异丙醇-20放置30min以上,13500离心,用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的,结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法,(液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄,50℃,1h)做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了,结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下!!!
4楼2011-03-29 09:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿南京大学,080500材料科学与工程,调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 289求调剂 +6 步川酷紫123 2026-03-11 6/300 2026-03-17 10:23 by Sammy2
[考研] 本人考085602 化学工程 专硕 +15 不知道叫什么! 2026-03-15 17/850 2026-03-17 10:13 by Sammy2
[考研] 293求调剂 +5 zjl的号 2026-03-16 6/300 2026-03-17 10:13 by zhyzzh
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 0805,333求调剂 +3 112253525 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:42 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +5 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:40 by JourneyLucky
[硕博家园] 085600 260分求调剂 +3 天空还下雨么 2026-03-13 5/250 2026-03-13 18:46 by 天空还下雨么
[考研] 一志愿211化学学硕310分求调剂 +8 努力奋斗112 2026-03-12 9/450 2026-03-13 15:41 by JourneyLucky
[考研] 土木第一志愿276求调剂,科研和技能十分丰富,求新兴方向的导师收留 +3 土木小天才 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:01 by JourneyLucky
[考研] 08食品或轻工求调剂,本科发表3篇sci一区top论文,一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵, 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-12 4/200 2026-03-12 19:33 by 求调剂zz
信息提示
请填处理意见