Znn3bq.jpeg
查看: 3289  |  回复: 52
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】怎么做都提不出DNA,请高手帮一下忙喽!!!! 已有23人参与

怎么做都提不出DNA,请高手帮一下忙喽!!!!
我是从青霉菌里提的,开始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后,12000离心10min,加两次氯仿:异戊醇(24:1)后离心10Min,12000收集上清,加等体积异丙醇-20放置30min以上,13500离心,用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的,结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法,(液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄,50℃,1h)做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了,结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下!!!

[ Last edited by 1949stone on 2011-4-21 at 12:54 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

河外生命

木虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 支持楼上 2011-04-21 12:54:04
说下实验细节,好让大家帮你分析
事在人为
3楼2011-03-28 21:39:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 53 个回答

zmw_520

禁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1): 有理 2011-04-21 12:53:50
本帖内容被屏蔽

2楼2011-03-28 20:00:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by 鬼笔坏坏 at 2011-03-28 18:52:28:

回复:我是从青霉菌里提的,开始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后,12000离心10min,加两次氯仿:异戊醇(24:1)后离心10Min,12000收集上清,加等体积异丙醇-20放置30min以上,13500离心,用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的,结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法,(液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄,50℃,1h)做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了,结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下!!!
4楼2011-03-29 09:12:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼笔坏坏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by zmw_520 at 2011-03-28 20:00:30:
从哪里提,用的什么方法咧???

我是从青霉菌里提的,开始用的SDS法,液氮研磨+500ul抽提缓冲液65℃水浴1h后,12000离心10min,加两次氯仿:异戊醇(24:1)后离心10Min,12000收集上清,加等体积异丙醇-20放置30min以上,13500离心,用75%乙醇洗无菌风吹干后加无菌水溶的,结果跑电泳只有RNA。然后做了好多次都这样。又换的氯化苄法,(液氮研磨0.1g+500ul缓液+125uLDE 10%SDS+300uL氯化苄,50℃,1h)做这个我连醋酸钠PH都调到5.2了,结果还是没有。就崩溃了,麻烦高手给指导一下!!!
5楼2011-03-29 09:14:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料334求调剂 +21 Eecho# 2026-04-03 21/1050 2026-04-08 22:55 by 猪会飞
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 0703调剂,一志愿天津大学319分 +23 haaaabcd 2026-04-05 26/1300 2026-04-08 16:19 by luoyongfeng
[考研] 315求调剂 +17 欣喜777 2026-04-04 18/900 2026-04-08 13:54 by hangsimei
[考研] 22408 266求调剂 +11 masss11222 2026-04-07 14/700 2026-04-08 11:06 by yulian1987
[考研] 本科郑州大学,一志愿华东师范大学282求调剂 +21 熊哥xtk 2026-04-07 24/1200 2026-04-08 09:48 by 123考研123
[考研] 生物医药调剂|SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 304求调剂(085602,过四级,一志愿985) +25 化工人999 2026-04-04 26/1300 2026-04-07 22:06 by hemengdong
[考研] 301求调剂 +18 121. 2026-04-04 18/900 2026-04-07 17:49 by 蓝云思雨
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 调剂 +4 mcbbc 2026-04-06 5/250 2026-04-07 12:33 by upczlm1989
[考研] 372分材料与化工(085600)英二数二求调剂 +4 蓝笺片 2026-04-06 4/200 2026-04-07 12:30 by dongzh2009
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +9 哇呼哼呼哼 2026-04-02 10/500 2026-04-06 19:47 by jean5056
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 331求调剂 +8 于征yz 2026-04-05 8/400 2026-04-06 00:54 by fmesaito
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 311分 22408 求调剂 +3 bing_bot 2026-04-03 3/150 2026-04-05 00:43 by chongya
[考研] 环境285分,过六级,求调剂 +10 xhr12 2026-04-02 10/500 2026-04-04 21:53 by bn53987
[考研] 一志愿上海大学生物学346 +3 上海大学346调剂 2026-04-03 3/150 2026-04-04 20:20 by dongzh2009
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-03 3/150 2026-04-03 23:01 by qzxyhcsy
信息提示
请填处理意见