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395353759铜虫 (小有名气)
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[交流]
【求助】脂肪酸标准品进行甲酯化后再气相色谱测定,要配成一定的浓度（1mg/ml），怎么� 已有5人参与
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我要对脂肪酸标准品进行甲酯化后再气相色谱测定，遇到的问题是：要配成一定的浓度（1mg/ml），怎么计算？ 参考的甲酯化方法如下：“总脂用10mL甲醇溶解后转移至分液漏斗中，用15mL正己烷分三次洗涤，所得甲醇溶液转移到大试管中，加入4mLp(KOH)=1％KOH的甲醇溶液，60℃水浴加热15min，冷却后加入5滴p(BF3)=20％的BF3乙醚溶液，静置l0min酯化。酯化后的样品加入5mL的重蒸正己烷和10ml水，分去水溶液，有机层用10mL水洗涤。取2．0ml的有机层加入一定量的硅胶，不振荡静置2．0min。取20．0uL的有机层加入到含有1．0mL正己烷的具塞试管中备用，作为进行气相色谱分析的样品。”这个方法是否可行？可行的话，我要称取多少脂肪酸标准品的量进行？上面方法中的试剂的量是否合适？最后取20ul有机层用1ml正己烷定容，这是不是就是最后脂肪酸甲酯化后的浓度？怎么计算他的浓度是多少？拜托，帮忙一下，第一次做色谱，自己老师也不懂！！！ |
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7楼2011-03-29 09:14:57
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| 这个过程中其实不需要定容的，你知道你知道你所用来测定脂肪酸的总脂的量就成。在甲酯化好之后加入一定量的你已知浓度的标准品（标准品只需要已知浓度就成，1mg/ml左右均可），也就只你知道加入了多少的标准品。最后根据标准品以及气相的出峰面积就可以得出各种脂肪酸的含量了～不过这个过程中还涉及到甲酯化程度的计算，也就是说标准品的量:总的甲酯化的样品的量=标准品的面积:总的甲酯化的脂肪酸的面积，其中标准品的量，标准品的面积，总的甲酯化的脂肪酸的面积均已知，可算出总的甲酯化的脂肪酸的量。根据最开始用来甲酯化的总脂量以及甲酯化好后总的脂肪酸的量，可以算出甲酯化的程度（及甲酯化的%），最后根据各个脂肪酸与标准品的比计算出各个甲酯化好后脂肪酸的量，在根据甲酯化程度计算出各个脂肪酸的量。呵呵～～不知道你明白了不？ |
2楼2011-03-28 14:23:46
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不明白。可以对着我的问题再讲一遍吗？ 3楼2011-03-28 15:32:38
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