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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】RNA降解
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gdongli8325

铁杆木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】RNA降解

提RNA后，测量浓度，都很低，在100-200ng/ul之间。跑胶发现RNA拖尾很严重。提取方法都是QIAGEN的盒子提的，个人认为提取过程不是问题。回想可能犯的错误，唯一能想出来的就是洗研钵的时候没有带手套，研钵清洗完后就直接用了。想问一下，这个是不是造成RNA降解的主要原因？
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1楼 2011-03-25 04:22:41
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)
★ ★
看天(金币+2): 鼓励交流 2011-03-25 22:58:08
QIAGEN的盒子基本都是室温做的
对操作要求就要个稍微高点了
不知道你的是不是。。。。。

室温下提取RNA是特别容易降解的，所以各方面都要很注意
研钵的处理是挺注意的，
没事，下次注意点就行
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6楼2011-03-25 17:02:48
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木偶娃娃

木虫 (正式写手)
研钵清洗完是怎么处理的？ 不是要高温180°以上8个小时吗？
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2楼2011-03-25 09:34:12
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yabxxh

木虫 (正式写手)
啥？洗完研钵就直接用了？你不高温处理过夜，也得象征性的用酒精点燃一会啊，这个降解还是很自然的
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3楼2011-03-25 09:45:23
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szylnl

银虫 (小有名气)
gdongli8325(金币+3): 2011-03-25 15:34:01
RNA的降解有两方面的原因，
1 外界RNA酶 2 菌体内部的RNA酶
外界的酶可以通过严谨的操作来去除，你说研钵的问题，有可能，可以再做一次，注意一下这个问题。 如果还是降解，那就要从内部的RNA酶方面来考虑，一般的试剂盒都会要求样品的量不能超过多少，你要注意自己样品的量 不能大于试剂盒上所要求的
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4楼2011-03-25 14:38:13
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