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ytficfuu木虫 (正式写手)
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【求助/交流】关于southern杂交非特异性杂交的问题 已有3人参与
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各位大虾,小弟近日正在做southern杂交,主要是看基因组中一个基因的拷贝数。大致流程如下:基因组酶切过夜--电泳(40V,3h)--真空转膜(5ih,1.5h)--紫外交联(1.2kj/cm,240s)--采用罗氏试剂盒标记显影。探针标记用的是随机引物标记法。 但是每次曝光出来的结果,经酶切后的样品经标记显色后,几乎全部都杂交上了,跟酶切后跑电泳看到的效果差不多,探针与阴性对照并不杂交。请各位大虾多多指教! |
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9楼2011-03-25 22:24:19
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