应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【求助/交流】关于southern杂交非特异性杂交的问题
91/1返回列表
查看: 1547  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ytficfuu

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于southern杂交非特异性杂交的问题 已有3人参与

各位大虾，小弟近日正在做southern杂交，主要是看基因组中一个基因的拷贝数。大致流程如下：基因组酶切过夜--电泳（40V，3h)--真空转膜(5ih,1.5h)--紫外交联（1.2kj/cm,240s)--采用罗氏试剂盒标记显影。探针标记用的是随机引物标记法。
但是每次曝光出来的结果，经酶切后的样品经标记显色后，几乎全部都杂交上了，跟酶切后跑电泳看到的效果差不多，探针与阴性对照并不杂交。请各位大虾多多指教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-03-24 20:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
楼主，上图吧，阴性对照是什么
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-24 21:54:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
LZ探针多长？
回复此楼
3楼2011-03-25 08:45:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytficfuu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-03-24 21:54:49:
楼主，上图吧，阴性对照是什么

找同学要的T载质粒，同时还有MarkerIII，这两个都没有条带，非常干净。
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-25 14:22:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytficfuu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 阿修罗Axuro at 2011-03-25 08:45:38:
LZ探针多长？

400bp，PCR条带很单一，而且做了胶回收。
赞一下 回复此楼
5楼2011-03-25 14:24:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1): 鼓励 2011-03-25 21:35:46
lz你是做转基因验证吗，如果是，那要用WT做对照~
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-03-25 14:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytficfuu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by shaquila at 2011-03-25 14:54:56:
lz你是做转基因验证吗，如果是，那要用WT做对照~

不是，是本来就有的基因
赞一下 回复此楼
7楼2011-03-25 20:06:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
有阳性质粒做对照吗，这个探针有搜索过特异性吗，杂交温度是不是有问题？
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-03-25 21:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是多少度杂交的？40几度还是60几度？
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-03-25 22:24:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ytficfuu 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 26申博 +4 八旬速览 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 302求调剂 +4 小贾同学123 2026-03-15 8/400 2026-03-17 10:33 by 小贾同学123
[考研] 药学383 求调剂 +3 药学chy 2026-03-15 4/200 2026-03-16 20:51 by 元子^0^
[考研] 328求调剂，英语六级551，有科研经历 +3 生物工程调剂 2026-03-16 4/200 2026-03-16 20:13 by Wangjingyue
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-15 3/150 2026-03-16 07:33 by Iveryant
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂0856材料化工 +12 z2839474511 2026-03-11 13/650 2026-03-13 10:39 by peike
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭