版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

[交流] 【求助/交流】纳豆激酶制备过程中蛋白含量测定结果令我很费解，希望各位大虾多多指教�

我是通过液体发酵制备而得的样品，离心得到上清后，硫酸铵盐析样品得到沉淀蛋白，透析后冷冻干燥得到蛋白样品，采用考马斯亮蓝染色法测得蛋白含量都为8-10%左右，那其余90%是什么呢?令我很费解，之后我以为方法上是不是误差太大，采用BCA试剂盒来测蛋白含量，同时测定试剂盒所带的BSA（2mg/ml）标准品，根据标曲算的我bsa蛋白浓度为1.9701mg/ml，相差不是很大，而我的纳豆激酶样品所测结果仍然为8-10%之间希望各位大虾给给意见，谢谢了！！！

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

生工检测理论与实务

» 猜你喜欢

回收溶剂求助已经有7人回复
职称评审没过，求安慰已经有40人回复
硝基苯如何除去已经有3人回复
A期刊撤稿已经有4人回复
垃圾破二本职称评审标准已经有17人回复
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿已经有22人回复
申请26博士已经有5人回复
EST投稿状态问题已经有7人回复
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦已经有4人回复
求助文献已经有3人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

蛋白电泳，第二向，溴酚蓝不是一条线，有两个向上的凸起，是什么原因造成的啊已经有5人回复
急，帮看看细胞色素脱氢酶活性测定结果已经有5人回复
蛋白制备电泳的具体方法或相关书籍已经有3人回复
求助有关SiO2溶胶，凝胶的制备已经有17人回复
30%浓度的双氧水（分析纯）的COD含量会有这么高吗？已经有17人回复
二正丁胺法侧NCO含量的问题已经有18人回复
ATRP聚合中的大分子引发剂制备需不需要通氮气已经有7人回复
纳米材料制备及应用研究已经有800人回复
zsm-5制备过程中出现透明结晶物已经有9人回复
制备真菌孢子悬浮液的问题——是固体好还是液体培养好？已经有18人回复
溶胶-凝胶水热法制备钛酸铋钠纳米线已经有16人回复
Ni/ Al2O3的具体制备方法已经有12人回复
多晶硅制备工艺已经有76人回复
柠檬酸钠含量测定已经有6人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-03-22 10:15:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

自己先顶起，别沉了

赞一下

回复此楼

2楼2011-03-22 10:33:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

在线等回复

回复此楼

3楼2011-03-22 10:54:53

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

再顶

回复此楼

4楼2011-03-22 16:42:14

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

henkally

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2011-03-22 17:03:39

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

henkally

禁虫 (著名写手)

★ ★
silicare(金币+2): 问题提的好，同问 2011-03-22 18:47:56

本帖内容被屏蔽

6楼2011-03-22 17:07:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

不好意思，怪我没说清楚
是这样的：我之前采用考马斯亮蓝蛋白试剂盒测我所得的蛋白样本，一共有10批样本，通过bsa标曲计算所得的蛋白量占样品总重的8~10%.但是那其余的90%是什么呢？按理说硫酸铵盐析大部分蛋白都下来了吧，但是为什么那么低呢？

我当时觉得是不是方法有问题，用BCA法莱印证一下，这也是我为什么要测BCA试剂盒里面附带的BSA蛋白浓度的原因。

可是那90%我怎么想也想不出，它到底是啥

谢谢各位老师和同学了。哪怕给那么一小点的指引我都感激不尽，真的
谢谢

赞一下

回复此楼

7楼2011-03-23 10:34:58

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

顶起！~别沉了

回复此楼

8楼2011-03-24 17:25:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

没人理我，顶

回复此楼

9楼2011-03-27 09:54:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

等待中···

回复此楼

10楼2011-03-28 15:16:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

songzhikui

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 20.2
帖子: 15
在线: 5.4小时
虫号: 254037

等待中·····

赞一下

回复此楼

11楼2011-03-28 15:17:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

dongchao

金虫 (小有名气)

应助: 4 (幼儿园)
金币: 47.9
帖子: 143
在线: 75.4小时
虫号: 699764

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

是纳豆发酵过程中产生的多聚谷氨酸,即PGA。我的信箱：dongchao8605@sina.com。我一直在做纳豆激酶方面的工作，可以联系。

赞一下(1人)

回复此楼

12楼2011-05-30 09:38:26

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

conroc

金虫 (正式写手)

应助: 33 (小学生)
金币: 1269
帖子: 426
在线: 201.9小时
虫号: 1078186

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

1楼: Originally posted by songzhikui at 2011-03-22 10:15:17:
我是通过液体发酵制备而得的样品，离心得到上清后，硫酸铵盐析样品得到沉淀蛋白，透析后冷冻干燥得到蛋白样品，采用考马斯亮蓝染色法测得蛋白含量都为8-10%左右，那其余90%是什么呢?令我很费解，之后我以为方法上 ...

很是有感触，最近用考马斯和lowery法分别测了下蛋白含量，都会有这个问题，测定的蛋白含量偏低，我们的菌也是联产聚谷氨酸的，我猜测有可能是这个原因，我是做纳豆激酶的分离纯化的，在最后纯化后，蛋白含量很低，不能用冷冻干燥称重量，只能选择用考马斯或lowery法测定，很是无语，测的少了吧，比活太高，老板说不可信。我又用纳豆激酶表品，在日本viko公司买的，做表品，测出来蛋白含量很高，结果比活太小，老板说，要是这样，你纯化了，没意义。我很是无语。。。我猜原因应该是纳豆激酶和G250结合不紧密，所以不容易测量。。。。

赞一下(1人)

回复此楼

13楼2011-09-22 15:49:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖