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[交流]
【求助】黄酮过大孔树脂柱的问题？
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| 各位虫友，本人有一些黄酮过大孔树脂柱的问题请教。过柱时流速怎么控制？怎么控制是多少倍的床层体积流速（BV/h)?柱的活塞阀是一直开着还是接液时才开？接液测黄酮吸附量时是怎么样操作法？请大家不吝赐教，本人第一次过柱。 |
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3楼2011-03-21 19:16:10
4楼2011-03-21 23:40:43
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Lj-wen(金币+2): 2011-03-22 11:44:38
Lj-wen(金币+1): 如果我用的是小柱子，湿法装柱，要测过柱液的吸光度，做过柱的工艺条件，收集过柱液时是要一上样就接液，还是过段时间啊，因为我觉得一上样就接液的话前期流下来的是留在柱中的水。怎么确定个标准什么时候接，还是忽略柱中的水啊。我上样液是50ml，是不是接过柱液也要50ml啊？ 2011-03-23 18:09:21
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-17 17:32:49
Lj-wen(金币+2): 2011-03-22 11:44:38
Lj-wen(金币+1): 如果我用的是小柱子，湿法装柱，要测过柱液的吸光度，做过柱的工艺条件，收集过柱液时是要一上样就接液，还是过段时间啊，因为我觉得一上样就接液的话前期流下来的是留在柱中的水。怎么确定个标准什么时候接，还是忽略柱中的水啊。我上样液是50ml，是不是接过柱液也要50ml啊？ 2011-03-23 18:09:21
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-17 17:32:49
一般上样时应该慢一些，保证其能够充分吸附，大概0.5BV/h，吸附过夜后，第二天进行洗脱，流速可以稍快1-2BV/h。接液体时活塞一直开着。如果你是粗分离不同极性的黄酮，可以先上根小柱，洗脱液可以先水洗除去糖成分，然后多设几个浓度进行提托，进液相检测，每一个浓度洗脱的黄酮种类及含量，具有相同成分的洗脱液可以合并，然后再上大柱按照最终的洗脱梯度进行洗脱，一般一个梯度5BV就可以了。 |
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