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Lj-wen

铁虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助】黄酮过大孔树脂柱的问题？

各位虫友，本人有一些黄酮过大孔树脂柱的问题请教。过柱时流速怎么控制？怎么控制是多少倍的床层体积流速（BV/h)?柱的活塞阀是一直开着还是接液时才开？接液测黄酮吸附量时是怎么样操作法？请大家不吝赐教，本人第一次过柱。

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1楼 2011-03-21 12:18:23

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49355087

金虫 (正式写手)

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★
Lj-wen(金币+2): 2011-03-22 11:44:38
Lj-wen(金币+1): 如果我用的是小柱子，湿法装柱，要测过柱液的吸光度，做过柱的工艺条件，收集过柱液时是要一上样就接液，还是过段时间啊，因为我觉得一上样就接液的话前期流下来的是留在柱中的水。怎么确定个标准什么时候接，还是忽略柱中的水啊。我上样液是50ml，是不是接过柱液也要50ml啊？ 2011-03-23 18:09:21
qinhy(金币+1): O(∩_∩)O谢谢~~~ 2011-04-17 17:32:49

一般上样时应该慢一些，保证其能够充分吸附，大概0.5BV/h，吸附过夜后，第二天进行洗脱，流速可以稍快1-2BV/h。接液体时活塞一直开着。如果你是粗分离不同极性的黄酮，可以先上根小柱，洗脱液可以先水洗除去糖成分，然后多设几个浓度进行提托，进液相检测，每一个浓度洗脱的黄酮种类及含量，具有相同成分的洗脱液可以合并，然后再上大柱按照最终的洗脱梯度进行洗脱，一般一个梯度5BV就可以了。

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5楼2011-03-22 10:36:37

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tyjackie

木虫 (正式写手)

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★
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-03-21 16:30:25
Lj-wen(金币+1): 2011-03-22 11:44:46

引用回帖:

Originally posted by Lj-wen at 2011-03-21 12:18:23:
各位虫友，本人有一些黄酮过大孔树脂柱的问题请教。过柱时流速怎么控制？怎么控制是多少倍的床层体积流速（BV/h)?柱的活塞阀是一直开着还是接液时才开？接液测黄酮吸附量时是怎么样操作法？请大家不吝赐教，本人第 ...

一般过柱流速是1-2BV/h的柱体积流速
活塞阀当然得一直开着啊，不要的洗脱液就弃去，需要的收集下来，即可
黄酮吸附量可以之前做动态吸附和静态吸附来确定上样量和树脂体积的关系

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2楼2011-03-21 14:01:57

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