应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增
51/1返回列表
查看: 5859  |  回复: 32
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

-超越beyond

铁虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】分子克隆后M13引物PCR扩增

我用的载体是pMD 19  ,插入片段是16S，挑克隆后用通用M13引物扩增，结果死活扩不出来，快急死我了，大家有没有同样的情况。这应该怎么办啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-18 10:15:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqhao2003

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by djrhewc at 2011-03-22 00:28:04:
这个和M13F & M13R不一样吧？~pEASY-T1的引物

peasy-t1正向引物M13R:CAGGAAACAGCTATGACC
           反向引物有两条一条是M13F:TGTAAAACGACGGCCAGT
          另一条是T7：TAATACGACTCACTATAGG
          两条引物都可以用来测序或扩PCR验证
载体图谱请见附件。

祝实验顺利！
赞一下(1人) 回复此楼
25楼2011-03-24 00:42:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 33 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
-超越beyond(金币+1): 谢谢 2011-03-19 17:04:16
重新挑取克隆试试。
赞一下 回复此楼
2楼2011-03-18 10:34:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

-超越beyond

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-03-18 10:34:58:
重新挑取克隆试试。

重新挑了还是不行啊
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-18 10:59:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

振子

新虫 (小有名气)

你好

-超越beyond(金币+1): 谢谢 2011-03-19 17:04:05
你所谓的扩不出来是没有阳性是吧？
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-18 11:39:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
-超越beyond12楼
2011-03-19 16:47   回复  
引用回帖:
Originally posted by zqhao2003 at 2011-03-19 00:02:56: 楼主是用的下面这对引物吗？可以用这对引物试试，Tm 55或53都可以。 M13F(-47) CGCCAGGGTTTTCCCAGTCACGAC M13R(-48) AGCGGATAACAATTTCACACAGGA 我们一般测序都是用这对引物的，很好用，扩PCR应该没有问题。 祝 ...

哦
查看全部 33 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭