| 查看: 5640 | 回复: 12 | ||||
[交流]
【求助】关于EDC和NHS的合成
|
||||
| 想要把-COOH和-NH2连在一起，打算使用EDC和NHS做交联剂，是在水溶液中进行的，想问一下加入顺序以及对溶剂的量的要求，谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 NHS-EDC使用简介 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
单曲播放» 猜你喜欢
考研化学308分求调剂
已经有11人回复
-
294求调剂材料与化工专硕
已经有16人回复
-
299求调剂
已经有8人回复
-
一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。
已经有4人回复
-
298求调剂
已经有3人回复
-
289求调剂
已经有10人回复
-
286求调剂
已经有11人回复
-
303求调剂
已经有3人回复
-
0703化学求调剂
已经有7人回复
-
295求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问，有人用EDC/NHS交联过羧基和氨基么？我试过很多次总是失败。…………
已经有10人回复
- 如何定量EDC/NHS交联剂的残留量
已经有6人回复
- 请教脱细胞类材料EDC/NHS交联问题
已经有4人回复
- EDC/NHS 用于羧酸和胺反应
已经有14人回复
- EDC？ DCC？NHS？HOBT？
已经有4人回复
- EDC/NHS活化酯的制备，原料反应不完？
已经有4人回复
- 请教EDC/NHS做酯化反应的问题，做过的朋友帮帮忙
已经有20人回复
- 对酸敏感的可以用EDC和NHS活化吗？
已经有8人回复
- 关于EDC和NHS 活化的-cooH能不能和氨基盐酸盐反应？
已经有19人回复
- 关于EDC/NHS ，羟基和羧基的问题
已经有11人回复
- 请教各位一个关于EDC/NHS偶联的问题
已经有23人回复
- 求助EDC和NHS偶联蛋白的原理，完整版的
已经有6人回复
- EDC和EDAC的区别？
已经有7人回复
- EDC/NHS催化生成酰胺
已经有10人回复
- 【求助】关于DCC/NHS合成的问题，急求帮助！
已经有13人回复
- 【求助】EDC/NHS缩合体系可以在DMSO中做吗？
已经有11人回复
- 【求助】EDC和NHS的混合液需要现配现用吗？
已经有10人回复
- 【求助】羧基的激活剂NHS或EDC
已经有24人回复
- 【请教】请教关于EDC和NHS？
已经有18人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
农业信息工程技术（专硕）招收调剂 沈阳农业大学
+1/178
-
马尔文激光粒度+纳米粒径Zeta电位测试原始数据与Origin绘图V131/2039/8821
+1/92
-
求助有机化学第二版陆阳申东升主编课件或者电子版书籍
+1/86
-
南京医科大学生殖医学与子代健康国重实验室-董飞宏课题组-2026年博士招生-9月入学
+1/84
-
化学化工学院 招收化工、化学、材料等相关方向研究生（学硕、专硕都有调剂名额）
+1/82
-
江南大学招收具有3年海外博后经历的青年教师
+1/81
-
浙江大学侯阳教授团队诚聘博士后---高性能固态电解质与固态电池器件设计
+1/76
-
北京-89175-事业单位-诚征女友
+1/72
-
沈阳农业大学生物与医药专硕招收调剂生！！！！！！！！！！
+1/47
-
招收2026年材料与化工专硕调剂，山东省属重点大学，过国家线即可调剂，名额充足
+2/42
-
2026 物理方向招收部分调剂
+1/33
-
从专科一路到211硕士，到TOP5博士，也想进高校体制
+1/29
-
招收荧光探针/有机合成/生物学 博士后--薪金: 30万-50万
+1/29
-
双一流湘潭大学化工学院招收化工、能源动力、工程热物理相关研究生调剂
+1/14
-
【2026调剂】南方科技大学-深圳理工大学-中科院 联培086000免疫方向(26.9入学)
+1/12
-
半导体光电子器件与集成
+1/8
-
上海师范大学有机化学专业研究生招生
+1/5
-
济南大学压电铁电材料与器件团队 招收博士生2–3名。
+1/5
-
海南师范大学 孙元元老师团队招2026级硕士生2名
+1/3
-
【博士招生】天津理工大学国家杰青王铁课题组招收2026年博士研究生
+1/3
8楼2011-07-24 23:56:59
2楼2011-03-21 20:10:17
3楼2011-04-19 10:16:20
4楼2011-04-19 19:51:38
5楼2011-04-22 11:22:54
6楼2011-05-05 22:14:56
7楼2011-07-24 23:20:09
9楼2011-08-15 17:19:28
10楼2012-03-02 07:21:34
11楼2013-05-28 11:24:26
12楼2014-03-13 14:25:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
Protocol 1. Dissolve the protein to be activated in 0.05 M MES, 0.5 M NaCl, pH 6.0 (reaction buffer), at a concentration of 1 mg/ml. 2. Add to the solution in step 1 a quantity of EDC and sulfo-NHS (Thermo Fisher) to obtain a concentration of 2 mM EDC and 5 mM sulfo-NHS. To aid in aliquoting the correct amount of these reagents, they may be quickly dissolved in the reaction buffer at a higher concentration, and then a volume immediately pipetted into the protein solution to obtain the proper molar quantities. 3. Mix and react for 15 minutes at room temperature. 4. Add 2-mercaptoethanol to the reaction solution to obtain a final concentration of 20 mM. Mix and incubate for 10 minutes at room temperature. Note: If the protein being activated is sensitive to this level of 2-mercaptoethanol, instead of quenching the reaction chemically, the activation may be terminated by desalting (step 5). 5. If the reaction was quenched by the addition of 2-mercaptoethanol, the activated protein may be added directly to a second protein or other amine-containing molecule for conjugation. Alternatively, or if no 2-mercaptoethanol was added, the activated protein may be purified from reaction by-products by gel filtration using a desalting resin. The desalting operation should be done rapidly to minimize hydrolysis and recover as much active ester functionality as possible. The use of centrifugal spin columns of some sort may afford the greatest speed in purification (Thermo Fisher). After purification, add the activated protein to the second molecule for conjugation. The second protein or other amine-containing molecule should be dissolved in 0.1 M sodium phosphate, pH 7.5. This will bring the pH of the coupling medium above pH 7.0 to initiate the active ester reaction. 6. React for at least 2 hours at room temperature. 7. Remove excess reactants by gel filtration or dialysis. |
13楼2014-07-05 21:26:23
