| 查看: 5504 | 回复: 12 | ||||
[交流]
【求助】关于EDC和NHS的合成
|
||||
| 想要把-COOH和-NH2连在一起，打算使用EDC和NHS做交联剂，是在水溶液中进行的，想问一下加入顺序以及对溶剂的量的要求，谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 NHS-EDC使用简介 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
单曲播放» 猜你喜欢
拟解决的关键科学问题还要不要写
已经有8人回复
-
最失望的一年
已经有17人回复
-
为什么nbs上溴 没有产物点出现呢
已经有6人回复
-
求推荐博导
已经有4人回复
-
存款400万可以在学校里躺平吗
已经有34人回复
-
求助一下有机合成大神
已经有4人回复
-
求推荐英文EI期刊
已经有5人回复
-
26申博
已经有3人回复
-
基金委咋了？2026年的指南还没有出来？
已经有10人回复
-
疑惑？
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问，有人用EDC/NHS交联过羧基和氨基么？我试过很多次总是失败。…………
已经有10人回复
- 如何定量EDC/NHS交联剂的残留量
已经有6人回复
- 请教脱细胞类材料EDC/NHS交联问题
已经有4人回复
- EDC/NHS 用于羧酸和胺反应
已经有14人回复
- EDC？ DCC？NHS？HOBT？
已经有4人回复
- EDC/NHS活化酯的制备，原料反应不完？
已经有4人回复
- 请教EDC/NHS做酯化反应的问题，做过的朋友帮帮忙
已经有20人回复
- 对酸敏感的可以用EDC和NHS活化吗？
已经有8人回复
- 关于EDC和NHS 活化的-cooH能不能和氨基盐酸盐反应？
已经有19人回复
- 关于EDC/NHS ，羟基和羧基的问题
已经有11人回复
- 请教各位一个关于EDC/NHS偶联的问题
已经有23人回复
- 求助EDC和NHS偶联蛋白的原理，完整版的
已经有6人回复
- EDC和EDAC的区别？
已经有7人回复
- EDC/NHS催化生成酰胺
已经有10人回复
- 【求助】关于DCC/NHS合成的问题，急求帮助！
已经有13人回复
- 【求助】EDC/NHS缩合体系可以在DMSO中做吗？
已经有11人回复
- 【求助】EDC和NHS的混合液需要现配现用吗？
已经有10人回复
- 【求助】羧基的激活剂NHS或EDC
已经有24人回复
- 【请教】请教关于EDC和NHS？
已经有18人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
浙江师范大学招收大气遥感、光学或人工智能方向的2026年物理学博士生1名
+2/276
-
上海87年GG诚求女友
+1/169
-
海南大学专任教师招聘：海洋工程与海洋智能装备相关方向【长期有效】
+2/124
-
自驾淄博回四川遂宁过年，寻找小伙伴一起
+1/81
-
上海交通大学变革分子学中心申涛课题组2026秋季入学推荐-考核制博士招生（有机）
+1/77
-
深圳大学信息功能聚合物电介质方向“申请-考核制”博士生招生
+2/70
-
中国地质大学（武汉）地质学、地质资源与地质工程、资源与环境方向招生，请尽快联系！
+1/68
-
中国科协青年托举（针对32岁青年人才的）是不是不搞了，25年都没有通知
+1/68
-
相约广东湛江，我们共同进步
+2/54
-
【教授本人】南佛罗里达大学化学系刘文奇课题组 2026 Fall 招收有机/超分子方向博士生
+1/29
-
【教授本人】南佛罗里达大学化学系刘文奇课题组 2026 Fall 招收有机/超分子方向博士生
+1/28
-
国重点实验室双一流A类长江学者团队招2026年全日制博士1-2名
+2/20
-
中国地质大学（武汉）分析地球化学团队招收博士生1名、硕士生3名
+2/16
-
云南大学智能光电子课题组招收申请-考核博士研究生1名（光电、光学）
+1/15
-
杨亚研究员课题组（广西大学-纳米能源研究中心）招收2026年物理学专业学术型博士
+1/7
-
多伦多城市大学深度学习方向博士后
+1/5
-
江文峰教授课题组招聘博士后
+1/4
-
河北工业大学层状材料与器件团队诚聘二维材料与原位电子显微学方向青年教师与博士后
+1/3
-
换工作
+1/3
-
标准求助 SN/T 5263-2020悬赏10个金币
+1/3
8楼2011-07-24 23:56:59
2楼2011-03-21 20:10:17
3楼2011-04-19 10:16:20
4楼2011-04-19 19:51:38
5楼2011-04-22 11:22:54
6楼2011-05-05 22:14:56
7楼2011-07-24 23:20:09
9楼2011-08-15 17:19:28
10楼2012-03-02 07:21:34
11楼2013-05-28 11:24:26
12楼2014-03-13 14:25:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
Protocol 1. Dissolve the protein to be activated in 0.05 M MES, 0.5 M NaCl, pH 6.0 (reaction buffer), at a concentration of 1 mg/ml. 2. Add to the solution in step 1 a quantity of EDC and sulfo-NHS (Thermo Fisher) to obtain a concentration of 2 mM EDC and 5 mM sulfo-NHS. To aid in aliquoting the correct amount of these reagents, they may be quickly dissolved in the reaction buffer at a higher concentration, and then a volume immediately pipetted into the protein solution to obtain the proper molar quantities. 3. Mix and react for 15 minutes at room temperature. 4. Add 2-mercaptoethanol to the reaction solution to obtain a final concentration of 20 mM. Mix and incubate for 10 minutes at room temperature. Note: If the protein being activated is sensitive to this level of 2-mercaptoethanol, instead of quenching the reaction chemically, the activation may be terminated by desalting (step 5). 5. If the reaction was quenched by the addition of 2-mercaptoethanol, the activated protein may be added directly to a second protein or other amine-containing molecule for conjugation. Alternatively, or if no 2-mercaptoethanol was added, the activated protein may be purified from reaction by-products by gel filtration using a desalting resin. The desalting operation should be done rapidly to minimize hydrolysis and recover as much active ester functionality as possible. The use of centrifugal spin columns of some sort may afford the greatest speed in purification (Thermo Fisher). After purification, add the activated protein to the second molecule for conjugation. The second protein or other amine-containing molecule should be dissolved in 0.1 M sodium phosphate, pH 7.5. This will bring the pH of the coupling medium above pH 7.0 to initiate the active ester reaction. 6. React for at least 2 hours at room temperature. 7. Remove excess reactants by gel filtration or dialysis. |
13楼2014-07-05 21:26:23