| 查看: 5987 | 回复: 12 | ||||
[交流]
【求助】关于EDC和NHS的合成
|
||||
| 想要把-COOH和-NH2连在一起，打算使用EDC和NHS做交联剂，是在水溶液中进行的，想问一下加入顺序以及对溶剂的量的要求，谢谢 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 NHS-EDC使用简介 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
单曲播放» 猜你喜欢
大龄残疾硕士的一点执念
已经有25人回复
-
今年E04面上
已经有22人回复
-
chemdraw
已经有6人回复
-
关于如何从代码看上不上会
已经有21人回复
-
祈祷青基必中
已经有10人回复
-
b口会评
已经有6人回复
-
信息学部会评时间
已经有3人回复
-
在职考研
已经有7人回复
-
MSER送审了还被拒稿
已经有5人回复
-
硝基还原
已经有5人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请问，有人用EDC/NHS交联过羧基和氨基么？我试过很多次总是失败。…………
已经有11人回复
- 如何定量EDC/NHS交联剂的残留量
已经有6人回复
- 请教脱细胞类材料EDC/NHS交联问题
已经有4人回复
- EDC/NHS 用于羧酸和胺反应
已经有14人回复
- EDC？ DCC？NHS？HOBT？
已经有4人回复
- EDC/NHS活化酯的制备，原料反应不完？
已经有4人回复
- 请教EDC/NHS做酯化反应的问题，做过的朋友帮帮忙
已经有20人回复
- 对酸敏感的可以用EDC和NHS活化吗？
已经有8人回复
- 关于EDC和NHS 活化的-cooH能不能和氨基盐酸盐反应？
已经有19人回复
- 关于EDC/NHS ，羟基和羧基的问题
已经有11人回复
- 请教各位一个关于EDC/NHS偶联的问题
已经有23人回复
- 求助EDC和NHS偶联蛋白的原理，完整版的
已经有6人回复
- EDC和EDAC的区别？
已经有7人回复
- EDC/NHS催化生成酰胺
已经有10人回复
- 【求助】关于DCC/NHS合成的问题，急求帮助！
已经有13人回复
- 【求助】EDC/NHS缩合体系可以在DMSO中做吗？
已经有11人回复
- 【求助】EDC和NHS的混合液需要现配现用吗？
已经有10人回复
- 【求助】羧基的激活剂NHS或EDC
已经有24人回复
- 【请教】请教关于EDC和NHS？
已经有18人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
27年入学博士招生（图像智能处理相关）
+1/177
-
热分析测试
+1/84
-
化学所分子识别实验室公开招聘项目聘用人员
+1/80
-
澳门大学周胤宁课题组招收2027年8月入学博士生
+1/41
-
北京理工大学长三角研究院（嘉兴）先进材料与智能装备团队 招聘
+1/30
-
【招聘】河南大学未来技术学院（量子信息）诚聘海内外英才
+1/30
-
回首往事
+1/26
-
南方科技大学医学院-神经胶质细胞课题组招收联培（客座）博士生
+1/20
-
南科大医学院神经胶质细胞课题组招收2027年入学博士生和博士后
+1/20
-
清华大学深圳国际研究生院宋桥课题组招收2027年博士研究生
+1/7
-
2氯5甲基吡啶和2氯6三氯甲基吡啶大生产工艺需求
+1/6
-
圣路易斯华盛顿大学管建均教授课题组招聘博士后（2名）
+1/5
-
诚聘智慧农业方向博士教师
+1/4
-
吉布斯自用能变、平衡常数、活度/分压计算
+1/3
-
EI 会议持续收稿，全科接收，检索稳定
+1/3
-
Forestry Economics Review（《林业经济评论》）2026年第一期正式上线
+1/3
-
北理工集成电路杰青团队 | 诚招科助理
+1/2
-
重庆大学药学院沈宏城课题组招聘弘深青年教师/博士后
+1/2
-
国家纳米中心招聘项目聘用研究助理
+1/2
-
武汉理工大学刘鹏飞院士团队招聘科研助理
+1/1
8楼2011-07-24 23:56:59
2楼2011-03-21 20:10:17
3楼2011-04-19 10:16:20
4楼2011-04-19 19:51:38
5楼2011-04-22 11:22:54
6楼2011-05-05 22:14:56
7楼2011-07-24 23:20:09
9楼2011-08-15 17:19:28
10楼2012-03-02 07:21:34
11楼2013-05-28 11:24:26
12楼2014-03-13 14:25:17
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
Protocol 1. Dissolve the protein to be activated in 0.05 M MES, 0.5 M NaCl, pH 6.0 (reaction buffer), at a concentration of 1 mg/ml. 2. Add to the solution in step 1 a quantity of EDC and sulfo-NHS (Thermo Fisher) to obtain a concentration of 2 mM EDC and 5 mM sulfo-NHS. To aid in aliquoting the correct amount of these reagents, they may be quickly dissolved in the reaction buffer at a higher concentration, and then a volume immediately pipetted into the protein solution to obtain the proper molar quantities. 3. Mix and react for 15 minutes at room temperature. 4. Add 2-mercaptoethanol to the reaction solution to obtain a final concentration of 20 mM. Mix and incubate for 10 minutes at room temperature. Note: If the protein being activated is sensitive to this level of 2-mercaptoethanol, instead of quenching the reaction chemically, the activation may be terminated by desalting (step 5). 5. If the reaction was quenched by the addition of 2-mercaptoethanol, the activated protein may be added directly to a second protein or other amine-containing molecule for conjugation. Alternatively, or if no 2-mercaptoethanol was added, the activated protein may be purified from reaction by-products by gel filtration using a desalting resin. The desalting operation should be done rapidly to minimize hydrolysis and recover as much active ester functionality as possible. The use of centrifugal spin columns of some sort may afford the greatest speed in purification (Thermo Fisher). After purification, add the activated protein to the second molecule for conjugation. The second protein or other amine-containing molecule should be dissolved in 0.1 M sodium phosphate, pH 7.5. This will bring the pH of the coupling medium above pH 7.0 to initiate the active ester reaction. 6. React for at least 2 hours at room temperature. 7. Remove excess reactants by gel filtration or dialysis. |
13楼2014-07-05 21:26:23