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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何除去磷酸化蛋白中残余的ATP
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yanjun3830

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】如何除去磷酸化蛋白中残余的ATP

小虫我做的课题是蛋白质磷酸化，但是目前实验需要把磷酸化蛋白中残余的ATP除去，试过几种方法（如：透析）都不太理想，大家有没有好的方法供我参考参考，小弟不胜感激！
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1楼 2011-03-11 21:44:23
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yanjun3830

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 看天 at 2011-03-11 22:26:04:
ATP不是很稳定吧，跳跳PH看看会不会自动水解了

多谢，我试试看！
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9楼2011-03-12 09:24:16
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yanjun3830

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qwz at 2011-03-11 22:01:13:
方法一：水溶性的蛋白，稀释后，用强碱阴离子大孔树脂吸附ATP，流出磷酸化的蛋白，然后超滤滤浓缩。
方法二：直接6000D分子量的操滤膜浓缩，浓缩到一定浓度，关闭透过液，回流加入相同pH值的水，继续超滤，反复几 ...

有没有相关的文献以及强碱阴离子大孔树脂的具体型号？
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10楼2011-03-12 10:31:48
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yanjun3830

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by qwz at 2011-03-13 00:42:38:
应该D218 和D296都可以，看你溶液中的无机盐浓度了，不管是无机磷酸根，还是氯根，硫酸根吸附量都有影响的，要是没有其他阳离子，吸附过程没有蛋白变性析出的情况，每一百毫升的树脂ATP的饱和吸附量应该是在26克左 ...

我的磷酸化样品很少，大概只有0.5毫升，想找一种能除去ATP，并且磷酸化蛋白回收率高一点的方法！多谢你的帮助！
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13楼2011-03-21 09:56:54
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