24小时热门版块排行榜    

查看: 4154  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

麦兜响当当

金虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】质粒跟目的基因连接不上怎么办

pMD 19与长片段cDNA连接,16度1h(或4度过夜),年前能连接上,现在连不上了,有人在做相关实验吗?能回答一下吗?
有人建议连接时间延长,可信吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sai00fuji

金虫 (正式写手)



翱宇(金币+1): 鼓励交流! 2011-03-13 15:40:46
麦兜响当当(金币+5): 2011-03-15 09:09:25
长片段我都是4度连接24h
片段放久了,末端的A会掉,你重新纯化看看
9楼2011-03-12 20:53:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

zhengfan1109

银虫 (正式写手)


★ ★
麦兜响当当(金币+10): thank you very much!实验条件和试剂材料都没有问题,除了室温年前年后这个可能不一样,can you give another explaination? your rapid answer will be highly appreciated! 2011-03-11 20:36:39
lstt09nk(金币+2): 鼓励 2011-03-12 15:33:39
引用回帖:
Originally posted by 麦兜响当当 at 2011-03-10 19:21:58:
pMD 19与长片段cDNA连接,16度1h(或4度过夜),年前能连接上,现在连不上了,有人在做相关实验吗?能回答一下吗?
有人建议连接时间延长,可信吗?

年前可以,年后不行,可能的原因太多了:
1) 你是否已经排除了所有试剂因素,包括连接酶,载体等等。比如其他人用这些酶或者载体成功过了吗?
2)你重复试验了吗?
3)感受态细胞是否存在问题?

这些都确定没问题了,再考虑其他问题。
2楼2011-03-10 19:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

phoenix211

金虫 (小有名气)


多连会,我们一般都十六度过夜。
换一批感受态,可能就好了。
4楼2011-03-12 11:10:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tw7921

铜虫 (初入文坛)


连的时间有点短,如果用的solution1还可以,用的T4要过夜。
另外最可能的就是感受态的效率过低
5楼2011-03-12 12:15:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +5 困困困困坤坤 2026-03-20 6/300 2026-03-22 17:41 by hxsm
[考研] 284求调剂 +5 Zhao anqi 2026-03-22 5/250 2026-03-22 17:38 by barlinike
[考研] 289求调剂 +7 怀瑾握瑜l 2026-03-20 7/350 2026-03-22 15:57 by ColorlessPI
[考研] 招08考数学 +3 laoshidan 2026-03-20 7/350 2026-03-22 12:54 by 在风落中
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-20 7/350 2026-03-21 19:05 by 15709483992
[考研] 一志愿深大,0703化学,总分302,求调剂 +4 七月-七七 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:20 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业(081702)315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 材料工程(专)一志愿985 初试335求调剂 +3 hiloiy 2026-03-17 4/200 2026-03-21 03:04 by JourneyLucky
[考研] 22408 344分 求调剂 一志愿 华电计算机技术 +4 solanXXX 2026-03-20 4/200 2026-03-20 23:49 by alg094825
[考研] 材料专硕英一数二306 +7 z1z2z3879 2026-03-18 7/350 2026-03-20 23:48 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学,327分,材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 275求调剂 +4 太阳花天天开心 2026-03-16 4/200 2026-03-17 10:53 by 功夫疯狂
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
信息提示
请填处理意见