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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】双酶切电泳条带拖尾严重，什么原因啊？
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天际雾影

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】双酶切电泳条带拖尾严重，什么原因啊？

我的双酶切，1道是用Pst1、BamH1,酶切结果700bp，2道是其对照；3道用Pst1、EcoR1,酶切结果300bp。两个都切了一个小时。为什么会出现这种现象啊？
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1楼 2011-03-09 20:40:02
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susizheng

木虫 (著名写手)
天际雾影(金币+2): 2011-03-11 13:07:59
弥散了，质粒切碎了，质粒没提好的时候就容易出这种情况，用的是哪个公司的盒子？
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2楼2011-03-09 20:53:04
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)
天际雾影(金币+1): 2011-03-11 13:08:15
BamH1 has star activity, you can reduce the incubation time, or try to use ONE buffer is more suitable for BamHI,
in addition, did you run the undigested plasmid_
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3楼2011-03-09 21:55:23
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phoenix211

金虫 (小有名气)
天际雾影(金币+2): 2011-03-11 13:07:47
有可能是质粒没提好。曾经我们实验室有一段时间也这样，后来换了试剂盒就好了。
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4楼2011-03-09 22:49:01
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huzhihong-

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-03-09 20:53:04:
弥散了，质粒切碎了，质粒没提好的时候就容易出这种情况，用的是哪个公司的盒子？

Bio Basic 生工代理的。以前没问题，但有段时间实验室都出现了这个问题。
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5楼2011-03-10 14:47:58
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默默的加油

银虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by phoenix211 at 2011-03-09 22:49:01:
有可能是质粒没提好。曾经我们实验室有一段时间也这样，后来换了试剂盒就好了。

有道理，质粒质量不好
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6楼2011-05-09 11:51:47
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bbwalkman

木虫 (小有名气)
★
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带式弥散的啊， 酶切一个小时不应该这样啊，重新提一下质粒 试试啊
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7楼2011-05-09 12:19:02
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appleXYJ

银虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
还要看看是否都是单一酶切位点
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8楼2011-05-09 12:58:42
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睡着数绵羊

银虫 (小有名气)
哎，实验啊~~~~~
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9楼2011-05-09 13:35:07
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如来神掌

捐助贵宾 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
重新提制粒 分步酶切看看
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10楼2011-05-11 17:30:32
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