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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 新药研发 » 质量控制 » 【求助】在主峰位置出现杂质峰怎么办
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szx1984

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助】在主峰位置出现杂质峰怎么办 已有7人参与

做头孢唑啉钠有关物质实验过程出现不进样在主峰位置出现杂质峰，走的是梯度，在其它实验室做就不出现，系统用异丙醇冲洗过，可以排除有机相和柱子因素，无机盐也换了几个厂家，用的是娃哈哈纯净水，请教一下高手怎么解决？谢谢！
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1楼 2011-03-08 17:04:09
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elescaller

铁杆木虫 (知名作家)

铁杆木虫 (无名作家)
以前也遇到过这情况，走梯度出现很多鬼峰，与楼主不同的是，我排查了一切因素，包括水、缓冲盐、有机相、色谱柱等等，色谱仪从安捷伦1200改成1100，又改成Waters，还是没有解决

原因可能就像2楼说的，溶剂比例达到某个值的时候，有气泡干扰。希望高手解惑！

[ Last edited by elescaller on 2011-3-9 at 13:40 ]
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6楼2011-03-09 13:37:56
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zhychen2008

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
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木笑笑(金币+1): 谢谢参与 2011-03-09 10:51:54
楼主采用的溶剂比例可能有问题，当比例达到某个值时，可能混合器无法完全排除气泡，导致出现上面所说现象，方便的话，看看你的流动相及其比例
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Yesterday.Today,Tomorrow！
2楼2011-03-08 20:51:46
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rabit5522

木虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
木笑笑(金币+2): 谢谢 2011-03-09 10:52:06
既然在其他的HPLC里没有此峰，就说明了，跟你的机器有关，通常造成这种现象的原因是残留的杂志，如果你的机器带有收集功能的话，可以少量收集该峰后定性，看是否是杂志，如若是杂质，那么可能是在进样针等处。可以通过换柱子，洗针，更换溶剂等方式来一一排除。如果不是杂质那可能就是梯度更换是导致的压力不稳出现的，可以注意观察出峰前后的压力变化。。这个问题只能是一个一个排除了。
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3楼2011-03-08 21:58:11
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szx1984

铜虫 (初入文坛)
方法是药典方法，流动相A是磷酸氢二钠2.91g和磷酸二轻钾0.71g溶解至1000ml，流动相B是乙腈，走梯度  时间       A               B
                                2               98             2
                               4                85             15
                               10              60            40
                               11.5           35            65  
                               12              35             65   
上面是部分梯度，出峰时间大约11.5
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4楼2011-03-09 13:17:24
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