24小时热门版块排行榜    

查看: 2758  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wqf@126.com

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】蛋白质的阴离子交换纯化 已有12人参与

各位大侠:
      
        我做的蛋白等电点是4.3,用PH=7.4的PBS缓冲液作为A液来平衡柱子,该缓冲液不含NaCl,结果出乎意料的是我的蛋白质竟然不能结合到柱子上去,而直接从柱子里穿透出来,这是为什么呢?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w.king124

金虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by rhy1027 at 2011-03-07 16:50:17:
首先纠正你一个说法,PBS中的S就是sodium的缩写,也就是说你的buffer是PB(即磷酸缓冲液)不是PBS。
你蛋白的等电点是预测出来的吧,一般来说,预测出来的等电点跟实际值相差不会超过1,但你所描述的情况我也遇到 ...

也纠正一下,PBS的全称是Phosphate buffered saline,所以S是saline而非sodium
12楼2011-03-08 19:49:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

微笑漩涡

新虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的蛋白对NaCl敏感么? 离子强度不够,蛋白挂不上去吧?
2楼2011-03-07 15:52:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqf@126.com

银虫 (正式写手)

应该不是因为这个原因,在做离子交换之前我加热处理了我的蛋白,不知道加热对它会不会有影响?
3楼2011-03-07 16:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lcy1971

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 鼓励新虫 2011-03-07 19:54:02
离子交换低盐上样,没有氯化钠不影响。
是不是柱子有问题?也许介质没处理好。找个阳性对照吧。
4楼2011-03-07 16:38:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 不应该看fileCode +6 且听虎啸 2026-08-12 8/400 2026-08-13 12:07 by 小木虫6752397
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 11/550 2026-08-13 10:40 by ZH远山
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 36/1800 2026-08-12 22:50 by sdfapple719
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
信息提示
请填处理意见