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txyamy

木虫 (小有名气)

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[交流] 【求助】嗜热链球菌和保加利亚乳杆菌的活化

如题，想知道从保藏的这两个菌株，如何活化复壮，
请达人指点！

谢谢

[ Last edited by lovibond on 2011-8-27 at 13:51 ]

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1楼 2011-03-06 11:32:19

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txyamy

木虫 (小有名气)

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下面这个方法就不需要了吗？

引用回帖:

Originally posted by 我爱普普 at 2011-03-07 22:13:47:
就是配制10% （还是50%具体数字我忘记了）的脱脂奶粉液体，分装到试管里，115°杀菌15分钟，这个是液体培养基，你接入菌种就可以活化了，

1. 菌株活化复壮
1.1编号
取盛有9mL无菌水的试管排列于试管架上，依次标明10-1、10-2～10-6。取无菌平皿3套，分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6。
1．2 稀释
待复壮菌种培养液在漩涡振荡器上混合均匀，用1mL无菌吸管精确的吸取1mL菌悬液于10-1的试管中，振荡混合均匀，然后另取一支吸管自10-1试管内吸1mL移入10-2试管内，依此方法进行系列稀释至10-6。
1．3 倒平板
用3支1mL无菌吸管分别吸取10-4、10-5、10-6的稀释液各0.1mL对号放入已编号的无菌培养皿中。无菌操作倒入溶化后冷却至45℃左右的MRS固体培养基10 mL～15mL,置水平位置，按同一方向，迅速混匀，待凝固后置于40℃培养箱中培养。
1.4 分离
取出培养48h 的培养皿，在无菌工作台上，用接种针挑取10个成棉花状较大的菌落，分别接种于液体MRS培养基中，置40℃培养箱中培养24h。
1.5 接种
按1%的接种量将纯化的培养物接种于已灭菌的复原脱脂乳中，同时接种具有较高活力的保加利亚乳杆菌于复原脱脂乳中作为对照。
1.6 活力测定
（1）观察：观察复原脱脂乳的凝乳时间。
（2）酸度：采用NaOH滴定法测定发酵乳液的酸度。
（3）计数：采用倾注平板法，测定活菌菌落数量。