[交流] 【求助/交流】请问大家：将外源DNA与载体连接的体系怎么确定啊？已有5人参与

将外源DNA与载体连接的体系怎么确定啊？我用TAKARA公司产的T4DNA连接酶，但是说明书上写的不太明确，什么DNA片段0.3pmol，载体DNA0.03pmol，这到底该怎么确定加多少μl？帮我出出主意，谢谢大家！

1楼 2011-03-02 08:44:38

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金虫 (正式写手)

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恩。同意沙发。。体系越小越好。一般5-10微升。。然后关键就是载体和外源DNA的比例，一般他们的分子数比例为1:3。。。所以你要对DNA和载体进行定量。。

4楼2011-03-02 09:04:27

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金虫 (正式写手)

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引用回帖:

Originally posted by worm2010 at 2011-03-02 09:07:56:
这个DNA和载体进行定量是怎么个定量法呀？

跑电泳。加上定量MARKER一起跑。。
然后拍照。。用专门的分析软件分析，如QUANTITY ONE

8楼2011-03-02 18:52:23

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