应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于去垢剂的那些麻烦事
71/1返回列表
查看: 1873  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

laoshu16

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于去垢剂的那些麻烦事

小女子做膜蛋白结构的，超量表达全靠融合蛋白MBP帮忙，但是要做结构和功能就必须过河拆桥，把MBP甩掉，采用了流行的TEV酶切，发现努力了很久只能切开50%左右，时间还超长，查文献多说是去垢剂的关系，不用去垢剂，蛋白又会聚集沉淀，所以想查一下各去垢剂在CMC以上各浓度在水溶液中的状态，比如多少胶束，多少单体，不知道从哪查起。各位大哥大姐路过的捧个场帮个忙吧，或者传授一下TEV酶切的小窍门，小女子在这里拜谢各位了，祝各位大哥大姐小弟小妹实验顺利，文章高产！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-03-01 16:36:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★
laoshu16(金币+1):谢谢参与
我也是做结构的，呵呵，不过没有做过膜蛋白。你们做膜蛋白筛选条件用的是LCP法么？

不是有去垢剂去除的柱子么？可以试试去除部分去垢剂，以降低CMC，然后再行酶切。

[ Last edited by brightfuture01 on 2011-3-1 at 17:43 ]
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-03-01 17:42:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laoshu16

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-03-01 17:42:02:
我也是做结构的，呵呵，不过没有做过膜蛋白。你们做膜蛋白筛选条件用的是LCP法么？

不是有去垢剂去除的柱子么？可以试试去除部分去垢剂，以降低CMC，然后再行酶切。

[ Last edited by brightfuture01 on 2 ...

不能除去去垢剂 要保护着我的蛋白啊 降到cmc以下就形不成胶束了
赞一下 回复此楼
3楼2011-03-01 18:04:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
引用回帖:
Originally posted by laoshu16 at 2011-03-01 18:04:59:
不能除去去垢剂 要保护着我的蛋白啊 降到cmc以下就形不成胶束了

呵呵，你的去垢剂用的刚好么？一点都不过呀，
赞一下 回复此楼
4楼2011-03-01 18:24:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

198619

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
请问你做出来了嘛？我也遇到了相同的问题，TEV切不动我的目的蛋白。做出来的话请问有什么高见呀！急需要解决，谢谢！
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2011-12-16 10:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heyar

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
酶切缓冲尽量低盐，可以加5mM的DTT更有利于TEV酶切

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
7楼2016-07-06 10:26:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
q876612365楼
2011-03-01 18:45   回复  
laoshu16(金币+1):谢谢参与
相关版块跳转 我要订阅楼主 laoshu16 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿西北工业大学289 085602 +32 yang婷 2026-04-10 33/1650 2026-04-12 02:41 by 秋豆菜芽
[考研] 求调剂，一志愿材料科学与工程985，365分， +7 材化李可 2026-04-11 9/450 2026-04-12 01:09 by 秋豆菜芽
[考研] 农学0904 312求调剂 +3 Say Never 2026-04-11 3/150 2026-04-11 17:22 by daydayup2005
[考研] 0859，337求调剂 +4 研s. 2026-04-10 4/200 2026-04-11 11:34 by caotw2020
[考研] 296求调剂 +6 汪！？！ 2026-04-09 6/300 2026-04-11 11:25 by zhq0425
[考研] 295分求调剂 +9 ?要上岸? 2026-04-10 9/450 2026-04-11 10:48 by qingpingzhu
[考研] 调剂 化学 307 +21 73372112 2026-04-09 23/1150 2026-04-10 23:53 by wj165256
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +20 慕绝cc 2026-04-09 24/1200 2026-04-10 10:22 by xujun0624
[考研] 青岛科技大学材料学院，环境学院调剂补录4月10日以前都可以 +3 1青科大。 2026-04-09 5/250 2026-04-10 09:58 by 翩翩一书生
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-05 11/550 2026-04-10 09:32 by 钟洲2011
[考研] 一志愿华工085600 331分 +6 天下ww 2026-04-09 6/300 2026-04-09 18:59 by l_paradox
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 1U盾记得记得就 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 270求调剂 +3 031127 2026-04-06 4/200 2026-04-08 21:00 by 逆水乘风
[考研] 一志愿哈工大，初试329，求环境科学与工程调剂！ +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 304求调剂 +10 素年祭语 2026-04-06 17/850 2026-04-08 09:05 by 蓝云思雨
[考研] 259求调剂 +5 就爱吃土豆呀呀 2026-04-07 5/250 2026-04-07 22:40 by JourneyLucky
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 338求调剂 +4 我想上岸ii 2026-04-05 4/200 2026-04-06 21:04 by 木子君1218
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭