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songzb2005

新虫 (小有名气)


[交流] 【求助】做完液相冲柱子的问题

以乙腈-磷酸盐缓冲液(取磷酸和三乙胺各4g加水至1000ml,混匀)(70∶30)为流动相,样品含磺酸基(也有硫酸残留)酸性较强,做完分析后,用流动相冲半小时后,换上甲醇/水为70∶30冲柱子,时间不长,就没压力了,好像是把泵堵了,超声后又正常。此情况出现了几次,应该是什么问题,用这样的流动相打样分析,做完后用什么冲柱子?还需要注意什么避免这种情况,先谢谢了

[ Last edited by songzb2005 on 2011-3-1 at 16:04 ]
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cpuyxj

金虫 (正式写手)


★ ★ ★
songzb2005(金币+1):谢谢参与
zhangy8627(金币+2): 感谢你的回答 2011-03-01 16:41:11
流动相加过缓冲盐后冲柱子一定要先用高比例水相开始冲,比如先用10%甲醇水溶液冲,多冲一会,最好20min以上,再逐渐增加甲醇的比例直到冲到纯甲醇,可以设个梯度程序啊。你用70%甲醇,有机相比例太高,里面的盐很容易析出来而堵塞柱子。
2楼2011-03-01 16:12:39
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mrzouhao

木虫之王 (文坛精英)



songzb2005(金币+1):谢谢参与
先用10%甲醇水溶液冲
3楼2011-03-01 16:24:28
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flowyang

铁杆木虫 (著名写手)



songzb2005(金币+1):谢谢参与
10%乙腈冲
4楼2011-03-01 18:16:13
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小醇醇

木虫 (正式写手)



songzb2005(金币+1):谢谢参与
先用 甲醇水10/90 冲半小时
再纯甲醇冲半小时
一般没问题
5楼2011-03-02 08:26:52
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森西罗

木虫 (小有名气)



songzb2005(金币+1):谢谢参与
甲醇比例太高,溶液极性偏低,无法溶解流动相中析出的强极性的盐成分,建议8%甲醇或乙腈的水溶液冲柱约30min,后用纯甲醇或纯乙腈保存色谱柱即可。
6楼2011-03-02 14:08:23
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