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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】PCR的问题
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夏尔list

金虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】PCR的问题

扩一个基因，1314bp，GC含量约有63%。
25微升体系如下：引物 0.5/0.5
                       10乘buffer 2.5
                            dNTP         0.5
                            Taq酶        0.5
                        cDNA（模板）1
                           DMSO          1
                           ddH2O       18.5

扩增设计：95℃         5min
                 95℃          45s
                 58、63℃   45s
                 72℃          1min30s
                 72℃           10min
                  4℃            hold
28个循环
扩了三次没有扩出来
GC含量高，一会准备换个GC buffer，但是师姐说那个没有什么用处。
请教各位大侠~~~
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1楼 2011-03-01 15:35:01
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wlsky24

新虫 (正式写手)
夏尔list(金币+2): 嗯，谢谢~~ 2011-03-01 21:30:40
换个高保真酶试试。
赞一下 回复此楼
8楼2011-03-01 21:28:09
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