24小时热门版块排行榜    

查看: 2167  |  回复: 16
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

冰鱼儿

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】真菌分子鉴定问题 已有7人参与

真菌分子鉴定里必须用到载体连接吗?急~~~
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

★ ★ ★
scelab(金币+3): 谢谢交流 2011-02-26 09:52:40
直接测序对回收DNA的要求比较高,有可能测不出来;
但是连接载体有可能连接上PCR过程中错配的;
综上,选择连接载体的,多送几个样,同时在PCR过程中选用高保真的酶
一直向前!
4楼2011-02-26 09:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 17 个回答

guozhibin

银虫 (小有名气)

应该不是吧,用真菌的rDNA通用引物ITS扩增出来后,直接测序就可以了。
2楼2011-02-25 21:04:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ottolzm

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
翱宇(金币+1): 鼓励交流 2011-02-25 21:33:47
用不用载体 取决于你的实验室 得到纯化后的真菌遗传指针信息 然后送交测序公司即可(但是像上海生工这样的公司 会要求你的DNA 的浓度为OD260/OD280到1.8至2.0 而且要你提供引物 如果是经典的比如18S等的 则不要 否则经常会测不出信号 如果实验室钱多 那就送到TaKaRa 日本人的服务很全面 而且质量可靠 但是价钱奇贵)   如果你们实验室做载体连接比较多 那就连个载体 再送出去测序 同样也要提供引物 但这样的话 可能会便宜一点 但是这样就将测序的一部分风险转嫁到你自己的因素上了 所以 这完全取决于你的选择了 祝你好运
3楼2011-02-25 21:15:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-02-27 18:21:11
不用连接,让测序公司电泳回收,直接把PCR产物送测,省时省力省钱,四天后能得到结果。

这样的帖子这几天有三张,加上以前的就更多了,楼主发帖之前先站内搜索一下就明白了,省力得多。不过楼主是昨天才加入的新人,以后会学会这招的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-02-26 12:59:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
信息提示
请填处理意见