| 查看: 283 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助/交流】包涵体求助！ 已有2人参与
|
|
包涵体是不是就是重组基因表达的蛋白质，因为缺少折叠啥的，与大肠杆菌表达的胰岛素有啥区别呢， 我刚刚接触到包涵体，所以提的问题请大家不要见笑啊！ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有262人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有6人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
已经有17人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】组氨酸标记的蛋白表达活性问题
已经有17人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】包涵体表达可以用凝血酶切掉histag吗
已经有5人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】如何使包涵体最大程度溶解
已经有5人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
- 【求助/交流】盐酸胍溶解包涵体问题，在线等
已经有4人回复
- [求助]原核表达如何减少包涵体
已经有23人回复
2楼2011-02-25 12:32:57
lxj341401
至尊木虫 (著名写手)
- MolEPI: 58
- 应助: 388 (硕士)
- 贵宾: 0.238
- 金币: 17138.7
- 红花: 43
- 帖子: 2251
- 在线: 712.4小时
- 虫号: 111074
- 注册: 2005-11-20
- 专业: 生物化学
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 2011-02-25 18:06:27
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+2): 2011-02-25 18:06:27
|
包涵体是指工程菌表达的蛋白在细胞内凝集，形成无活性的固体颗粒。一般含有50%以上的重组蛋白，其余为核糖体元件、RNA聚合酶、外膜蛋白ompC、ompF和ompA等，环状或缺口的质粒DNA，以及脂体、脂多糖等，大小为0.5-1um，难溶与水，只溶于变性剂如尿素、盐酸胍等。 包涵体的形成主要因为在重组蛋白的表达过程中缺乏某些蛋白质折叠的辅助因子，或环境不适，无法形成正确的次级键等原因形成的。 1、表达量过高，研究发现在低表达时很少形成包涵体，表达量越高越容易形成包涵体。原因可能是合成速度太快，以至于没有足够的时间进行折叠，二硫键不能正确的配对，过多的蛋白间的非特异性结合，蛋白质无法达到足够的溶解度等。 2、重组蛋白的氨基酸组成：一般说含硫氨基酸越多越易形成包涵体，而脯氨酸的含量明显与包涵体的形成呈正相关。 3、重组蛋白所处的环境：发酵温度高或胞内pH接近蛋白的等电点时容易形成包涵体。 4、重组蛋白是大肠杆菌的异源蛋白，由于缺乏真核生物中翻译后修饰所需酶类，致使中间体大量积累，容易形成包涵体沉淀。因此有人采用共表达分子伴侣的方法以增加可溶蛋白的比例。 |
3楼2011-02-25 17:51:55
