应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】关于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
51/1返回列表
查看: 1164  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

水云

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】关于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳

以前一直做变性电泳，最近出现个问题，做纯化的时候某些蛋白怎么也出不去，而且显示分子量很大，在200KD以上。有人推荐做一次非变性看看。
问一下，非变性的条件怎么样，是不是就是配胶的时候有点差别？
非变性和分子量与电荷都有关系，怎么确定某个蛋白的具体位置呢？用marker么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-02-23 09:07:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

水云

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-02-23 01:20:39:
非变性在配胶、buffer、loading buffer 中均不能有变性剂存在。在上样之前也不能煮。

我们跑非变性都是在纯度大于95%的情况下为了检测蛋白是不是有多聚。

恩，对，我们也考虑是不是有多聚体存在。
我看有些人用非变性做活性分析，那么我有个问题就是，在有电荷和分子量两个影响因素的情况下，怎么确定目的蛋白的位置呢？
赞一下 回复此楼
3楼2011-02-23 09:23:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
★ ★ ★
水云(金币+1): 2011-02-23 09:23:33
dhd997(金币+3): good 2011-02-23 09:46:51
非变性在配胶、buffer、loading buffer 中均不能有变性剂存在。在上样之前也不能煮。

我们跑非变性都是在纯度大于95%的情况下为了检测蛋白是不是有多聚。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-02-23 09:20:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)
水云(金币+1): 2011-07-07 14:45:09
引用回帖:
Originally posted by 水云 at 2011-02-23 01:23:26:
恩，对，我们也考虑是不是有多聚体存在。
我看有些人用非变性做活性分析，那么我有个问题就是，在有电荷和分子量两个影响因素的情况下，怎么确定目的蛋白的位置呢？

呵呵，位置是无法确定的哦。只能通过目的蛋白的量和杂蛋白的量来看，毕竟95%都是你的目的蛋白嘛，条带自然会很粗。
赞一下 回复此楼
4楼2011-02-23 11:46:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭