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baggio00009

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】求助，新手组培及细胞悬浮培养

大家好，我是新手做组培及细胞培养，有几个问题想问问大家。
1.我想问问做MS培养基的时候激素应该在灭菌之前加还是之后加？要是在灭菌之后加比较好的话，应该如何操作才能不染菌呢
2.我做的植物在悬浮细胞培养继代的时候，我通常是过滤后取一定重量的细胞放入新培养基中，但是这种植物细胞很难过滤，很费时间，所以经常会染菌，我很郁闷，不知道我这么做对不对，是不是有其他的什么解决办法。
3. 有没有细胞悬浮培养方面比较好的书或者材料推荐一下，最好是实验方面的。不胜感激

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1楼2011-02-15 22:06:13

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Bella0224

金虫 (小有名气)

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激素要在超净工作台里，利用0.22um的过滤器进行除菌过滤，你可以下在外面将激素粉末溶解好，然后再在超净工作台里进行过滤，需要购买过滤器和注射器，找一个也是灭菌的离心管之类的，看你自己啦，然后用1.5mlEP管进行分装，保存在-20度~

激素和抗生素都可以配置1000×的母液，就是把你的目的浓度扩大1000倍，加的时候枪头要用灭菌过的，按照相应体积比例缩小加就行了~

加激素要等到灭菌后的培养基室凉至不烫手，温和的时候就差不多了，我们一般就是40度左右，激素在高温下会降解