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sanmaoecho

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 496.5
帖子: 59
在线: 20.4小时
虫号: 1166207

[交流] 【求助/交流】细胞系转染的时间探讨

想了解一下大家做细胞转染时的几个小细节：1、对于293、293T这种贴壁不是很紧的细胞系，大家都是分了细胞之后多长时间做转染呢？或者细胞长到那种密度做转染呢？2、转染之后大家都是多久收细胞呢？或者是多大密度收细胞呢？3、转染之后的细胞如果很长时间不收，例如48h~72h不收细胞，转进去的外源基因还有没有表达呢？表达量怎么样呢？希望和有经验的大侠探讨一下啊

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1楼 2011-01-21 14:19:14

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peng5053

银虫 (正式写手)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 303
帖子: 326
在线: 90.5小时
虫号: 589471

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

对于细胞转染，一般在细胞中期转染，转染效率会相对高一些。这个时候的细胞状态是最好的。对于HEK293T来说，一般转染的最佳时间是在传代后24hr以内。转染后48hr，外源基因肯定是有表达的。至于72hr，应该也还是有表达的，可能表达量会很低，主要是这个时间点的细胞大部分都衰老了。建议293T收集细胞，在转染后36-48hr收集。