应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】细胞系转染的时间探讨
81/1返回列表
查看: 4766  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

sanmaoecho

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞系转染的时间探讨

想了解一下大家做细胞转染时的几个小细节：1、对于293、293T这种贴壁不是很紧的细胞系，大家都是分了细胞之后多长时间做转染呢？或者细胞长到那种密度做转染呢？2、转染之后大家都是多久收细胞呢？或者是多大密度收细胞呢？3、转染之后的细胞如果很长时间不收，例如48h~72h不收细胞，转进去的外源基因还有没有表达呢？表达量怎么样呢？希望和有经验的大侠探讨一下啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-01-21 14:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng__

金虫 (著名写手)
sanmaoecho(金币+1): 2011-01-21 17:31:01
1,  铺板24-48转染   主要看你铺的密度  想24H的话可以1W每孔

2，脂质体转染24H够了，不过我们做的时候不收细胞，直接做flipr

3, 48H还没神马问题的，72就不知道了
赞一下 回复此楼
2楼2011-01-21 16:05:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sanmaoecho

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by feng__ at 2011-01-21 16:05:35:
1,  铺板24-48转染   主要看你铺的密度  想24H的话可以1W每孔

2，脂质体转染24H够了，不过我们做的时候不收细胞，直接做flipr

3, 48H还没神马问题的，72就不知道了

谢谢！如果我想在铺板之后16h或者更短的时间内做转然可以吗？用的是维格拉斯的VigoFect脂质体
赞一下 回复此楼
3楼2011-01-21 17:33:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feng__

金虫 (著名写手)
sanmaoecho(金币+1): 谢谢！ 2011-01-22 09:00:17
引用回帖:
Originally posted by sanmaoecho at 2011-01-21 17:33:44:

谢谢！如果我想在铺板之后16h或者更短的时间内做转然可以吗？用的是维格拉斯的VigoFect脂质体

细胞铺的密一点就行了
赞一下 回复此楼
4楼2011-01-22 00:12:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhp1984816

铜虫 (初入文坛)
★ ★
sanmaoecho(金币+1): 谢谢！ 2011-01-22 09:00:30
silicare(金币+2): 谢谢分享 2011-01-22 11:09:22
这个转染的时间根据细胞的密度吧，我一般5000细胞每孔种入24孔板。待细胞长到60——70%的时候开始转染，这个看细胞系，有的细胞长的快，种完后需要的时间短些。转染完后我们做luciferase，都是24小时后收取细胞。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-01-22 00:37:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

26264716

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我也有这样的疑问。。
我转293T细胞，以前分后24H转，用lipo2000，效果好。。6h换液，48h-72h收样。。。。
效果不错。。
但这次分了后发现细胞不够，准备尝试下楼上说的48h内转。。。希望有好的结果。。。。
赞一下 回复此楼
6楼2013-03-07 19:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peng5053

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
对于细胞转染，一般在细胞中期转染，转染效率会相对高一些。这个时候的细胞状态是最好的。对于HEK293T来说，一般转染的最佳时间是在传代后24hr以内。转染后48hr，外源基因肯定是有表达的。至于72hr，应该也还是有表达的，可能表达量会很低，主要是这个时间点的细胞大部分都衰老了。建议293T收集细胞，在转染后36-48hr收集。
赞一下 回复此楼
7楼2013-03-08 11:33:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

louisa俊

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
293T的话，控制好细胞数，第二天就可以转了。。。
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-19 14:51:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 sanmaoecho 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 PYZmcHr5kSaq 2026-11-05 6/300 2026-11-06 00:01 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 4/200 2026-11-05 23:39 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 23:19 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 9/450 2026-11-05 23:17 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 10/500 2026-11-05 23:17 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 23:08 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-05 22:46 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 22:35 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 22:33 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 20/1000 2026-11-05 22:33 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 17/850 2026-11-05 22:24 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 3/150 2026-11-05 21:05 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-05 20:43 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 20:43 by qL1cU46YIdK0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 8/400 2026-11-05 20:23 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 20:10 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 20:10 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:00 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:15 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 10:39 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭