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晒不干的鱼

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】荧光定量RT-PCR 已有5人参与

各位高手前辈,求教:双重适时荧光定量RT-PCR,注意事项,及相关文献或资料。
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晒不干的鲈鱼
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有一种叫做google scholar或者pubmed或者sciencedirect的东西……
2楼2011-01-19 10:58:34
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bigboy123

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
双重的,还RT,有难度。
可以先拿DNA模板来做,调好了再换成RNA,再调。
供应PCR增量剂
3楼2011-01-19 17:43:52
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晒不干的鱼

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
Originally posted by bigboy123 at 2011-01-19 17:43:52:
双重的,还RT,有难度。
可以先拿DNA模板来做,调好了再换成RNA,再调。

是的,我应该先拿cDNA来做,然后我看了发表的文章确实有一步实时荧光定量方法。目前,我还在设计引物,不知道选择RNA的哪个片段呢,还在学习。
晒不干的鲈鱼
4楼2011-03-23 14:28:08
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翱宇

禁虫 (正式写手)

将军


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一步法虽然省事些,但不如两步法,RT完成后的cDNA可以稀释使用多次,也节省RNA!
5楼2011-03-23 18:19:52
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cxfans

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
翱宇(金币+2): 鼓励交流! 2011-03-26 15:07:49
可巧 我其实也在探索,我觉得做双重rt pcr,可能搞不好会是引物交叉,而且选用rna还是dna要看你是要检测某基因的表达,还是监测dna含量。照你意思应该是后者,因为用rna多是用其反转录的cdna。这样设计引物,就找到那段cdna文库了。以上为我的见解,可能不对,我是新手
6楼2011-03-25 21:47:59
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