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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问我这个毕赤GS115表达是怎么回事? 已有3人参与

请问大家我的25度和28度中间那两条粗带是怎么回事?我看别人表达的都没有,我的目的蛋白在67000的位置,这些都是胞外上清液浓缩几十倍出现的条带!
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liujianmin68 at 2011-01-14 07:37:07:
我用毕赤GS115表达胞内蛋白时也有这两条粗带,具体什么我并不是很清楚。你的Marker跑的太差,给你提个建议:电泳时,在Marker的另一边的点样孔中随便加入几微升的样品,这样跑出来的Marker就很好了,希望对你有所 ...

你好,最近有点事,没怎么上论坛,不好意思。你的蛋白也表达出两条带吗,那算蛋白大小的时候是按哪条蛋白来计算,是不是应该用上面的那条带来计算啊。另外我也想做胞内表达,看看胞内表达跟胞外表达的蛋白分子量是不是一样,是不是有切错信号肽的情况,请问做胞内表达的策略是什么,怎么去掉9k的a-factor,多谢啊!!!!
4楼2011-01-31 12:44:38
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liujianmin68

木虫 (职业作家)

努力发展交叉学科

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
最爱花诗雨(金币+2):鼓励新虫,欢迎交流~~ 2011-01-14 09:10:22
我用毕赤GS115表达胞内蛋白时也有这两条粗带,具体什么我并不是很清楚。你的Marker跑的太差,给你提个建议:电泳时,在Marker的另一边的点样孔中随便加入几微升的样品,这样跑出来的Marker就很好了,希望对你有所帮助。
转向地质微生物学
2楼2011-01-14 07:37:07
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

可能降解比较严重
仕不可不弘毅,任重而道远
3楼2011-01-14 07:44:28
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jia1012428

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by liujianmin68 at 2011-01-14 07:37:07:
我用毕赤GS115表达胞内蛋白时也有这两条粗带,具体什么我并不是很清楚。你的Marker跑的太差,给你提个建议:电泳时,在Marker的另一边的点样孔中随便加入几微升的样品,这样跑出来的Marker就很好了,希望对你有所 ...

哥们,你想过为什么出现2条带吗,是不是由于糖基化的结果,还是一些其他原因。。。
5楼2011-01-31 22:38:25
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