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李玲飞吧

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】酶的离心问题 已有5人参与

用多年前老师留下的预处理过得发酵液分离纯化酶,可是6000rpm(老师的经验值)离心1个小时都无法分离得到澄清的上清液,上清液中总是残留酶的絮状物,舍弃太浪费,不舍又很不好处理,怎么会儿事?请各位高手赐教!
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
6000rpm只能沉淀菌体,不能沉淀酶蛋白,除非形成包涵体。
2楼2011-01-13 18:23:07
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游子8921

铁杆木虫 (知名作家)

游子8921


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你做的是什么酶?请指教。
为了自己的目标而奋斗,一切皆有可能
3楼2011-01-13 20:21:09
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李玲飞吧

铜虫 (小有名气)

以前自己从发酵开始做,6000rpm完全能够分离开氧化酶沉淀(80%硫酸铵沉淀过夜),第一次出现这种情况。
4楼2011-01-14 15:52:43
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们破壁完之后都是18000g离心30-60分钟,上清还要过滤之后才过镍柱或者离子交换柱。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2011-01-14 15:54:20
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DH5a

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还有部分菌体没有离下来,加大转速,再离心
6楼2011-01-15 15:11:59
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