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【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？已有5人参与
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请教一下高手，有没有用组织蛋白提取液做过elisa的？用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？ 等待有经验者解答，多谢多谢~~~~ |
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dianaofyezi
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3楼2011-01-14 17:26:36
xhjggl
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rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:12:44
rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-14 14:12:44
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要看你所要研究的目的蛋白质在膜上，核内还是胞质中，RIPA裂解液对膜上和核内蛋白提取效率比较差。如果是这样，还是买专门的细胞结构蛋白质提取试剂盒，上海生工就有。 膜蛋白和胞质蛋白提取试剂盒 Membrane and Cytoplasmic Protein Extraction kit 产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取膜蛋白和胞质蛋白，提取制备过程简便。匀浆后的匀浆液经过低速离心去除未破碎的细胞和细胞核后的上清，再高速离心得到的上清中含有胞质蛋白，沉淀经过溶解后，得到膜蛋白。制备的膜蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究，可以用于培养细胞或动物组织中蛋白质的提取。每次可以处理107个细胞或100mg动物组织，可以使用50次。储存条件：2-～8℃ 产品特点： 1. 提取的蛋白最大限度地保持活性，可以用于pull down,EMSA,IP等实验; 2. 内含有的蛋白酶和磷酸酶抑制试剂可以避免蛋白质的酶解和蛋白质磷酸化状况被破坏; 3. 整个实验过程只需要2个小时左右; 4. 无需要超速离心，可以并行处理多个样本。 编号 包装 价格 产地 BSP005 50 Assays 560 生工 细胞核蛋白/浆蛋白抽提试剂盒 Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取核蛋白和胞质蛋白，提取制备过程简便。制备的核蛋白和胞浆蛋白能保持天然活性，并且纯度较高。提取的蛋白可用于进一步的转录因子活性分析、凝胶阻滞实验(gel shift assay)、免疫共沉淀、Western Blotting、酶活性测定等后续蛋白质研究，可以每次从1×107个培养细胞或200mg 组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。储存条件：2-～8℃。 产品特点： 1．最大限度保持蛋白质活性，可以用于EMSA，Pull down,Enzyme activity assay等实验； 2．整个操作过程只需要一个小时左右； 3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取； 4．避免蛋白酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性； 5．可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP001 50 Assays 520 生工 胞质和线粒体蛋白质提取试剂盒 Cytoplasmic and Mitochondrial Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒提供独特的组份可以提取动物细胞及组织中的胞质蛋白和线粒体蛋白。该方法先将完整的有活性的线粒体和胞质蛋白分离，再处理后获得高纯度的有活性胞质蛋白和变性的线粒体蛋白，不需要超速度离心，方法简单，可靠，快速。可用于1D，2D电泳，Western Blot，Elisa等蛋白质实验。提取的完整线粒体也可以经过活性溶解液处理，再用于免疫共沉淀，凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学研究，或进行线粒体DNA提取，用于基因组学后续研究。本试剂盒可以每次从1×107个培养细胞或200mg 组织中提取所需要的蛋白质，可以使用50次。储存条件：2-～8℃。 产品特点： 1．整个实验过程大约只需要1小时左右； 2．可以从50×107个培养细胞或50×200mg 组织中提取所需要的蛋白质或活性线粒体； 3．提取的活性线粒体可以用于凋亡，细胞信号传导，能量代谢等生理学或线粒体基因组学后续研究； 4．活性线粒体的提取量高，高效线粒体溶解Buffer提取的蛋白质，可以用于线粒体蛋白质组学研究； 5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP051 50 Assays 380 生工 膜蛋白提取试剂盒 Membrane Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒提供独特的组份提取细胞及组织中的膜蛋白。特殊的提取Buffer在裂解细胞的同时，经过特殊处理，还可以选择性地分离提取细胞膜蛋白和胞器质膜蛋白。提取方法简单，可靠，快速。获得的膜蛋白纯度高，可用于SDS-PAGE电泳、 Western Blot、免疫共沉淀,细胞信号传导等后续研究, ,每次可以提取107个培养细胞或200mg动物组织，本试剂盒可以使用50次。储存条件：2-～8℃。 产品特点： 1．整个操作过程只需要60分钟左右; 2．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取; 3．避免蛋白酶对蛋白质的降解，保持膜蛋白质的完整性和天然活性; 4．提取的膜蛋白纯度高,不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP049 50 Assays 380 生工 全蛋白提取试剂盒 Tissue or Cell Total Protein Extraction Kit 产品说明：本试剂盒用于从哺乳动物组织和培养细胞中提取全蛋白， 用含有蛋白酶抑制剂及磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液Lysis Buffer匀浆裂解组织或细胞，作用温和，提取过程简便高效,可以提取出培养细胞或动物组织中的决大多数蛋白质。获得的全蛋白可用于Western Blot、免疫共沉淀，酶活性分析，Pull down,EMSA等后续研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究，因本试剂盒中包括这两种酶的抑制剂，可以每次从107个培养细胞或200mg动物组织提取蛋白质，本试剂盒可以使用50次。储存条件：2～8℃。 产品特点： 1．提取的蛋白质包括膜,核,核基质和胞质蛋白,而且最大限度保持蛋白质活性； 2．整个操作过程只需要30分钟左右； 3．即可以用于培养细胞（50x107个），有可以用于动物组织（50x200mg）蛋白质的提取； 4．避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解，保持蛋白质的完整性和天然活性； 5．不需要超速度离心，可以同时处理多个样品。 编号 包装 价格 产地 BSP003 50 Assays 520 生工 [ Last edited by xhjggl on 2011-1-14 at 20:32 ] |
2楼2011-01-14 13:54:48
4楼2011-01-17 00:34:46
6楼2013-04-18 10:46:32