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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

[求助] 提膜蛋白裂解液配方

今天导师让提膜蛋白,哪位高人有np-40或者其他的提膜蛋白的裂解液的配方?谢谢了!!
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临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

子曰包子好吃(金币+1): ripa是含有sds的 能破坏核膜的。不过还是谢谢你 2011-07-23 10:31:26
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-23 10:01:19:
今天导师让提膜蛋白,哪位高人有np-40或者其他的提膜蛋白的裂解液的配方?谢谢了!!

去网上搜。。好像有RIPA这个buffer
2楼2011-07-23 10:15:05
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xhjggl

木虫 (正式写手)

什么生物的膜蛋白?
3楼2011-07-23 12:07:10
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


子曰包子好吃(金币+1): 请问有详细的反复冻融的步骤吗?? 2011-07-23 14:05:39
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-08-17 00:07:29
我之前有做过一种膜蛋白,加了RIPA强裂解液还加了低渗溶液,反复冻融过,总之把膜破碎就行,
人有绝交,才有至交!
4楼2011-07-23 13:27:35
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

肿瘤细胞的膜蛋白

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

5楼2011-07-23 14:04:20
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小蕾8676

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
4楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-07-23 13:27:35:
我之前有做过一种膜蛋白,加了RIPA强裂解液还加了低渗溶液,反复冻融过,总之把膜破碎就行,

请问您有提膜蛋白的方法吗,可以给我参考下吗?
6楼2011-08-16 23:15:43
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小蕾8676

新虫 (初入文坛)


引用回帖:
5楼: Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-23 14:04:20:
肿瘤细胞的膜蛋白

请问您有提肿瘤细胞膜蛋白的方法吗,可以给我参考下吗?
7楼2011-08-16 23:16:25
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 小蕾8676 at 2011-08-16 23:16:25:
请问您有提肿瘤细胞膜蛋白的方法吗,可以给我参考下吗?

我老师给我一个粗提膜蛋白的方法,就是将RIPA中的SDS去掉,裂解细胞后直接离心14000rpm 20min。然后上清为胞质蛋白,最下的pallet为细胞核和膜碎片,再加ripa裂解,正常提蛋白,作为膜蛋白。离心后在pallet和上清之间有一部分絮状物,我到现在没弄明白是啥?
8楼2011-08-18 09:59:13
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仲尼

新虫 (小有名气)

我也准备提取膜蛋白(牛组织)做western,不知道用哪种裂解液,之前考虑过RIPA中等强度的裂解液,还没有进行试验。
高手可以详细说下,你后来是怎么处理的,结果怎么样?
9楼2014-08-10 15:30:01
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shanghongxia

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-08-18 09:59:13
我老师给我一个粗提膜蛋白的方法,就是将RIPA中的SDS去掉,裂解细胞后直接离心14000rpm 20min。然后上清为胞质蛋白,最下的pallet为细胞核和膜碎片,再加ripa裂解,正常提蛋白,作为膜蛋白。离心后在pallet和上清之 ...

您好,看到您有讲关于提取细胞膜蛋白的方法,很是激动。请问您可否把提取步骤告诉我一下呢?谢谢
10楼2015-12-31 11:27:54
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