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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 提膜蛋白裂解液配方
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

[求助] 提膜蛋白裂解液配方

今天导师让提膜蛋白，哪位高人有np-40或者其他的提膜蛋白的裂解液的配方？谢谢了！！
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1楼 2011-07-23 10:01:19
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临风7071

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

子曰包子好吃(金币+1): ripa是含有sds的 能破坏核膜的。不过还是谢谢你 2011-07-23 10:31:26
引用回帖:
Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-23 10:01:19:
今天导师让提膜蛋白，哪位高人有np-40或者其他的提膜蛋白的裂解液的配方？谢谢了！！

去网上搜。。好像有RIPA这个buffer
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2楼2011-07-23 10:15:05
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xhjggl

木虫 (正式写手)
什么生物的膜蛋白?
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3楼2011-07-23 12:07:10
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晴天1882

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
子曰包子好吃(金币+1): 请问有详细的反复冻融的步骤吗？？ 2011-07-23 14:05:39
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-08-17 00:07:29
我之前有做过一种膜蛋白，加了RIPA强裂解液还加了低渗溶液，反复冻融过，总之把膜破碎就行，
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人有绝交，才有至交！
4楼2011-07-23 13:27:35
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
肿瘤细胞的膜蛋白
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shanghongxia
5楼2011-07-23 14:04:20
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小蕾8676

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 晴天1882 at 2011-07-23 13:27:35:
我之前有做过一种膜蛋白，加了RIPA强裂解液还加了低渗溶液，反复冻融过，总之把膜破碎就行，

请问您有提膜蛋白的方法吗，可以给我参考下吗？
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6楼2011-08-16 23:15:43
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小蕾8676

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-07-23 14:04:20:
肿瘤细胞的膜蛋白

请问您有提肿瘤细胞膜蛋白的方法吗，可以给我参考下吗？
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7楼2011-08-16 23:16:25
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 小蕾8676 at 2011-08-16 23:16:25:
请问您有提肿瘤细胞膜蛋白的方法吗，可以给我参考下吗？

我老师给我一个粗提膜蛋白的方法，就是将RIPA中的SDS去掉，裂解细胞后直接离心14000rpm 20min。然后上清为胞质蛋白，最下的pallet为细胞核和膜碎片，再加ripa裂解，正常提蛋白，作为膜蛋白。离心后在pallet和上清之间有一部分絮状物，我到现在没弄明白是啥？
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8楼2011-08-18 09:59:13
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仲尼

新虫 (小有名气)
我也准备提取膜蛋白（牛组织）做western，不知道用哪种裂解液，之前考虑过RIPA中等强度的裂解液，还没有进行试验。
高手可以详细说下，你后来是怎么处理的，结果怎么样？
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9楼2014-08-10 15:30:01
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shanghongxia

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 子曰包子好吃 at 2011-08-18 09:59:13
我老师给我一个粗提膜蛋白的方法，就是将RIPA中的SDS去掉，裂解细胞后直接离心14000rpm 20min。然后上清为胞质蛋白，最下的pallet为细胞核和膜碎片，再加ripa裂解，正常提蛋白，作为膜蛋白。离心后在pallet和上清之 ...

您好，看到您有讲关于提取细胞膜蛋白的方法，很是激动。请问您可否把提取步骤告诉我一下呢？谢谢
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10楼2015-12-31 11:27:54
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