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xwsooo

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】异丙醇沉淀DNA已有18人参与

不知道为什么用异丙醇沉淀DNA,静置10分钟,离心10分钟,吸取上清后,怎么不见有DNA沉淀呀??
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):哈哈,够严谨。 2011-01-12 07:35:43
1、异丙醇商品是否可信?
2、异丙醇用量如何?
3、加异丙醇之后是否冷冻?
4、离心转速和时间如何?
5、既然没有沉淀,你怎么判断何为上清?
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-01-11 16:07:35
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
DNA沉淀量少的话是看不到的。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-01-11 14:58:51
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xuchunhua2003

银虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
翱宇(金币+2):谢谢经验分享,其实我们实验室沉淀RNA也用异丙醇,但是不要时间过长! 2011-01-11 21:10:05
静止时间比较短,你可以冰上放置半小时,一般温度低地话比较容易看到析出的DNA,如果还看不到就离心一下,看试管底部有没有白色沉淀,如果还看不到的话,就少量溶解一下,凝胶电泳检测是不是有DNA
3楼2011-01-11 15:12:39
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haitian0625

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2011-01-12 07:36:23
我们是裂解后,直接加入异丙醇,上下颠倒晃动,若看到沉淀多了,就直接挑出来;少了,离心10/15min,然后倒掉上清、晾干。
5楼2011-01-11 16:19:38
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