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孙丫头

金虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】请教高人：GST-pull down找出B蛋白和A蛋白相互作用，下游实验要怎么做啊

以前没做过这方面的实验，我构建了A蛋白的表达载体，GST-pull down实验找到了B蛋白和A相互作用。那我接下来要做些什么实验呢。A蛋白已知参与一些功能。请高人指点，感激不尽啊。老板催得紧呢！

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1楼2011-01-11 10:26:38

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coltsun

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

170100楼: Originally posted by 孙丫头 at 2011-01-11 10:26:38
以前没做过这方面的实验，我构建了A蛋白的表达载体，GST-pull down实验找到了B蛋白和A相互作用。那我接下来要做些什么实验呢。A蛋白已知参与一些功能。请高人指点，感激不尽啊。老板催得紧呢！

GST Pull-down算是在in vitro条件下检测两蛋白是否互作的手段，既然可以了，那就不妨通过Co-IP一类的方法看看在in vivo条件下是否互作吧

另外不知道你的研究方向，如果和结构相关不妨研究一下互作位点和互作方式。