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【求助/交流】分离酵母质粒
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xuanmu0929
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虫号: 1077391
[交流]
【求助/交流】分离酵母质粒
我从酵母中提取两种质粒,用试剂盒提的,PCR鉴定两种质粒均提出来了,它们具有不同抗性,因为想测序,所以把质粒转入大肠杆菌,寻找只有一种抗性的菌株然后去测序,可是一直转不进去,不知有没有更好的方法
[
Last edited by xuanmu0929 on 2011-1-10 at 08:50
]
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2011-01-10 08:44:43
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susizheng
木虫
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Originally posted by
xuanmu0929
at 2011-01-10 13:40:05:
是穿梭质粒,质粒浓度太低了,只有50ng/ul,估计测序测不出来
50ng/ul,不低了,符合测序要求。
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11楼
2011-01-10 15:32:31
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real339
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xuanmu0929(金币+1): 2011-01-10 10:50:50
转入大肠杆菌?是能在大肠杆菌复制的质粒吗?
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2楼
2011-01-10 09:55:23
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zx1984
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xuanmu0929(金币+1): 2011-01-10 10:50:42
质粒的量是多少?是不是太多了
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3楼
2011-01-10 10:08:08
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xuanmu0929
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real339
at 2011-01-10 09:55:23:
转入大肠杆菌?是能在大肠杆菌复制的质粒吗?
是的,转超级菌,培养好几天,只长出很小的菌落,挑单克隆置于相应抗性的培养基中却不生长,不知有其他的分离法方法吗?谢谢
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4楼
2011-01-10 10:50:11
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