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【求助/交流】提取基因组DNA后琼脂糖凝胶电泳显示拖尾
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laughitoff
新虫
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虫号: 985046
[交流]
【求助/交流】提取基因组DNA后琼脂糖凝胶电泳显示拖尾
各位大虾,我提取基因组DNA活,跑琼脂糖凝胶电泳显示出拖尾现象,不知道是什么原因,怎么解决,药品我已经换过一批,但是结果还是一样!请各位帮助!
我提的是沼气发酵过程中样品的DNA,用的是氯苯法!
[
Last edited by laughitoff on 2011-1-9 at 14:55
]
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2011-01-09 13:08:22
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brightfuture01
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rainwander(金币+2):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-09 21:40:49
引用回帖:
Originally posted by
laughitoff
at 2011-01-09 13:08:22:
各位大虾,我提取基因组DNA活,跑琼脂糖凝胶电泳显示出拖尾现象,不知道是什么原因,怎么解决,药品我已经换过一批,但是结果还是一样!请各位帮助!
我提的是沼气发酵过程中样品的DNA,用的是氯苯法!
[
La ...
呵呵,拖尾的问题很可能是实验上的一些细节造成的。我提沼气发酵样品微生物宏基因组DNA的时候用的是周集中的那个经典CTAB法,跑0.8%的电泳看,23kb是单一条带。
注意整个过程中的枪尖是剪掉头部的,吸取上清等步骤要轻柔。注意到这些细节,提取出来的应该是23kb左右的单一条带。另外,可能需要多提几次练练手。
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3楼
2011-01-09 16:47:30
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yangguoliguo
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rainwander(金币+1):鼓励积极参与交流~~~ 2011-01-09 21:39:49
1、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液,加2微升溴酚蓝便可,注意上样浓度;
2、可能是原液浓度太大造成的;
3、可能DNA已降解。
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2011-01-09 16:41:15
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也许有腐殖酸等杂质的污染呢?
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4楼
2011-01-09 19:43:02
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laughitoff
新虫
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我取过的样品是加入Extration Buffer,在-20度保存的,提取前两天解冻的,但从第一次提取的时候就脱尾啦,但现在已经好几天了,会不会出现菌体自溶现象,造成有小的DNA片段,产生拖尾吗,而且我在提取之前我已经离心了!
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6楼
2011-01-09 20:56:58
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