| 查看: 3998 | 回复: 9 | ||||
[交流]
【求助/交流】反转录时该选用oligo dT还是 随机6引物？
|
| 不太明白什么时候选用oligo dT，什么时候选用随机引物, 求指点 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生化实验经验积累 |
» 猜你喜欢
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有206人回复
-
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助！救命！我该怎么选择？！
已经有12人回复
- CTD申报资料中 已知杂质结构确证 部分该怎么写呢？
已经有11人回复
- 嵌套PCR引物如何设计？目的片段434bp
已经有6人回复
- 引物加保护碱基
已经有7人回复
- 求助：PCR扩增片段测序结果引物中间多出150bp的片段
已经有5人回复
- 化艺小硕 环境水处理和生物材料该如何选择？
已经有3人回复
- 高氏一号分离的菌用16S通用引物扩增不出条带
已经有9人回复
- 反转录引物的选择与Real-Time PCR引物设计的要求
已经有298人回复
- 【求助/交流】Takara反转录试剂盒中oligo dT 和 random 6 mers的差别
已经有12人回复
- 【求助/交流】Oligo dT-Adaptor Primer的基因序列
已经有4人回复
★ ★ ★
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-09 08:57:44
xnbioinfor(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+2):鼓励积极参与~~~ 2011-01-09 08:57:44
|
使用oligo dT引物扩增的产物, 可以保证扩增产物包括mRNA的3'末端(减少rRNA的干扰), 但是oligo dT primer扩增有一个问题, 就是扩增片段的长度和扩增产物所包含的信息量的问题, 之所以有长度这个问题,一方面和lz所提到的RNA完整性有关,但最重要的限制在于逆转录酶的延伸能力. 用oligo dT primer扩增可能出现扩增出来的片段长度短, 虽然都有mRNA的3'端, 但是序列信息多位于3'-UTR附近, 若扩增序列太短,则有用信息很少, 不利于序列的识别和分析. 使用random primer, 也有片段长度的限制, 但是由于它的逆转录并不一定在mRNA的末端起始, 而是在随机位置起始,所以它的扩增片段带有更多CDS的信息.但是如果是用总RNA逆转录的话,有可能会受到rRNA的干扰. 至于Gsp,只是在扩增已知gene/gene family以及部分原理的RACE中使用. |
2楼2011-01-08 23:07:42
3楼2011-01-08 23:58:48
4楼2011-01-17 21:26:13
5楼2011-01-17 21:26:37
6楼2011-01-20 18:48:36
7楼2013-03-20 21:43:41
8楼2013-03-22 07:45:52
9楼2013-03-31 22:15:12
10楼2014-06-22 12:12:08