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【求助/交流】P不出正确条带
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asdfghjkl-00
新虫
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[交流]
【求助/交流】P不出正确条带
我设计的引物是900的,但是在750出来了一个,500出来了一个,我P 了好几次,否没有得到正确条带,请问是怎么回事啊?是反映条件的问题还是引物问题?如果是反映条件的问题,该如何改进?如果是引物的问题,有没有什么办法可以验证引物的正确性啊?
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2011-01-08 11:13:50
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asdfghjkl-00
新虫
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虫号: 1101143
引用回帖:
Originally posted by
qujinyan123
at 2011-01-08 16:51:32:
出现非特异性条带,首先要考虑的是引物的问题,引物设计是不是合理。是否进行了同源性检查。
第二,就是反应体系的问题,各组分的浓度问题,比如如果dNTP加入太多,也会引起非特异性条带,你可以重新优化一下 ...
我的引物序列是从文献上看的,我想知道如何判断它是否合理。请教一下,该怎么进行同源性检查?谢谢!
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7楼
2011-01-09 09:20:42
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天使托
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★
dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-08 14:49:41
你的问题的确很多,可以看看版内的引物设计专题,另外看看自己的引物设计的是否合适;再看看反应的体系,可以改变反应体系!
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2楼
2011-01-08 14:45:10
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pxhcooh
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★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖交流
asdfghjkl-00(金币+1): 2011-01-09 09:21:46
你把你的引物设计信息给大家看看 或许会有答案
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3楼
2011-01-08 14:49:09
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zx1984
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虫号: 1176692
★
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2011-01-08 16:02:52
引物、模板、时间、温度,好好查查
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4楼
2011-01-08 15:18:06
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