24小时热门版块排行榜    

查看: 12346  |  回复: 23

jen1006

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】单克隆摇菌16小时后LB液体培养基还没有变混浊求原因 已有19人参与

DH5a菌种,LB液体培养基分装几管1.5ml离心管(400ulLB培养基+0.4ulAmp),挑单克隆没问题!37°,260转,摇了16h后仍然没见混浊,跪求正解!!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):有可能 2011-01-08 12:23:32
可能是板子有问题,长出来的是假阳性。
Thank-you,so-blue.
2楼2011-01-08 12:18:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

j2

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1.5的EP管摇菌?好节约啊。这样可以吗?请教~
氨苄的量加多了不长?要不就LS说的,假阳性?
修炼ing,当虫仙……
3楼2011-01-08 13:05:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+3):good 2011-01-08 14:49:16
reasonspare:谢谢你的分享,其实楼上说的板子,我们可以通常认为是筛选克隆子所用的平板,如果筛选的平板有问题,自然后可以挑到假阳性克隆,所以二楼的板子还是有关系,在者斑竹加分还是有标准的,这就是为什么同一个斑竹给了2楼1各金币,而你的应助值3各金币。希望这样解释你的疑问。 2011-01-12 07:51:27
二楼,这跟板子有什么关系?而且版主还给莫名其妙的奖励了?

个人认为的原因:

1:EP管子你怎么摇啊?能摇开吗?可以尝试用大离心管来摇菌,抗生素按比例加入!

2:抗生素浓度过大,可以降低浓度

3:菌中的质粒丢失,导致菌不长!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
4楼2011-01-08 14:43:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ankang0910

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~~ 2011-01-08 22:38:31
胡说,1.5EP管怎么不能摇菌了。二楼说的有道理。
可能没连上,挑的都是空载体。如果是这个原因,建议连接时降低载体加入量。
也可能抗性没有加均匀,若是每管每管的加,Amp100按1:1000往里加,楼主抗性加的合适,不多,因为氨苄抗性本来就不强,再多加些也能摇浑。
希望提供更多信息。
P.S.这样摇菌信号弱。
实验顺利!!
5楼2011-01-08 22:10:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
不知道你的氨苄浓度时多少,

如果氨苄是通用的浓度的话,

那么你的氨苄加的太多了。

另:1.5ml的管子可以摇菌,没问题
千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
6楼2011-01-08 22:40:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amp 失效很快的。

1.5的管子可以摇菌。
7楼2011-01-08 22:57:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jen1006

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ankang0910 at 2011-01-08 22:10:22:
胡说,1.5EP管怎么不能摇菌了。二楼说的有道理。
可能没连上,挑的都是空载体。如果是这个原因,建议连接时降低载体加入量。
也可能抗性没有加均匀,若是每管每管的加,Amp100按1:1000往里加,楼主抗性加的合适 ...

谢谢啊,了然一二
8楼2011-01-10 10:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jen1006

新虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ankang0910 at 2011-01-08 22:10:22:
胡说,1.5EP管怎么不能摇菌了。二楼说的有道理。
可能没连上,挑的都是空载体。如果是这个原因,建议连接时降低载体加入量。
也可能抗性没有加均匀,若是每管每管的加,Amp100按1:1000往里加,楼主抗性加的合适 ...

对了,我是用10ul枪头挑菌的,会不会是我菌挑的不好?
9楼2011-01-10 10:30:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
silicare(金币+2):假阳性,杂菌 2011-01-10 11:54:57
呵呵,1.5mL的EP是可以摇菌的,只是浓度不如通气状况好的时候。

有可能挑的菌是假阳性。

最坏的可能就是噬菌体。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
10楼2011-01-10 10:33:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jen1006 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 70/3500 2026-08-16 08:29 by 医学老男孩
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[文学芳草园] 阿姨 +4 汪汪锅 2026-08-09 4/200 2026-08-13 19:43 by arzu_hma
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
请填处理意见