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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】单克隆摇菌16小时后LB液体培养基还没有变混浊求原因
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
引用回帖:
Originally posted by jen1006 at 2011-01-10 10:30:28:

对了，我是用10ul枪头挑菌的，会不会是我菌挑的不好？

不会的，呵呵。随便蘸一点都可以长起来的。大肠不是一般的好养，给点东西就长。
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
11楼2011-01-10 10:34:27
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gaoyang636

木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+5):鼓励新虫交流 2011-01-12 09:59:16
看看管底部有碎片没有？别真感染噬菌体了……夏天多见，现在还好～
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12楼2011-01-10 12:21:11
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jen1006

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaoyang636 at 2011-01-10 12:21:11:
看看管底部有碎片没有？别真感染噬菌体了……夏天多见，现在还好～

有碎片什么意思啊？不明白，由于第一次做TA克隆，不懂！求解，什么叫有碎片啊
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13楼2011-01-11 15:06:14
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hfkset

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1.5ml离心管绝对可以摇菌，特别是样品数量很多的时候，很方便
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14楼2011-01-11 17:15:43
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2011-01-12 07:53:59
TA克隆，你是在兰白斑筛选吗？这个很不靠谱的，假阳性和假阴性都很高，我见过全是假阳性和假阴的，完全就是反着的，这可能与你的T载体有关；另外，如果你的平板上没有抗生素的话也会出现你所说的这种情况；以上两点仅供参考
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15楼2011-01-12 00:27:01
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sai00fuji

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):谢谢交流 2011-01-12 09:59:42
空载也会长菌的好不好，抗性基因是在载体上又不是在片段上
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16楼2011-01-12 09:52:59
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看了这么多回帖，其实我很纳闷，既然在板子上能够长出菌落，那为什么扩大培养的时候长不起来？（能在板子上生长，说明其体内有抗性基因，板子与1.5M离心管除Agar有区别外，其余均一致）。
可能的解释有一种：涂板的时候Amp失活导致挑菌均无抗性，而扩大培养用培养基Amp正常，无抗性杂菌均不能生长。
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
17楼2011-08-24 14:53:31
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南海所老龚

新虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+4): Good！两贴一起奖励。 2011-08-25 16:56:50
引用回帖:
5楼: Originally posted by ankang0910 at 2011-01-08 22:10:22:
胡说，1.5EP管怎么不能摇菌了。二楼说的有道理。
可能没连上，挑的都是空载体。如果是这个原因，建议连接时降低载体加入量。
也可能抗性没有加均匀，若是每管每管的加，Amp100按1:1000往里加，楼主抗性加的合适 ...

就算挑的都是空载体，扩大培养也会浑浊的。
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TheBestandMostBeautifulThingsintheWorldCan'tBeSeenorTouched,TheyMustBeFeltwithHeart.
18楼2011-08-24 14:56:14
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hf2016

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+2): 鼓励交流。我们用枪头挑，直接扔进去倒是没问题。不知道是不是牙签有吸附作用…… 2011-08-25 16:57:48
我们实验室以前遇到过用同样是用牙签跳的菌，一种是扔进培养基摇菌，一种是牙签在培养基里涮一下扔掉那种，结果前者长得很慢或者不长，后者长得倒挺快，不知道是不是有类似的原因
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一切开始于结束之后
19楼2011-08-25 08:34:27
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孙梦婧

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励下。细菌还是很好养的，LB很快就会到常温，而且摇菌的时间那么长，影响不大的。 2011-08-26 17:31:29
我们都是用大试管摇，加5ml的LB。还有LB在要之前最好是常温状态的，太凉不利于摇菌。
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努力向前看
20楼2011-08-25 22:44:44
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