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sspxiaoji

银虫 (正式写手)

[交流] 【原创】SFDA中关于工程菌种库基因型鉴定方法--RAPD 已有3人参与

SFDA中关于工程菌种库建立时要求对基因型进行RAPD鉴定方法,有谁做过这方面的工作吗?该如何操作(对照?引物?)?PCR并电泳后如何判断其基因型?
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下文为SFDA原文摘录
2.工程菌库
    工程菌主种子库和工作种子库的建立和检测应按现行《中国药典》相关要求建立。
    (1)工程菌主种子库的检定
    ①菌种同一性鉴定:菌种/株的来源、基因型及表型。基因型通
    过RAPD方法鉴定,通过测定重组质粒的特殊标记和抗药性标记确定表型。
    ②菌种培养纯度检定:外源因子(如杂菌、真菌、噬菌体等)的检测。
    ③菌种稳定性检定:转化菌的比例,扩增条件、质粒拷贝数,基因表达量、允许的传代次数。
    ④基因表达盒序列分析:插入的目的片段以及调控序列进行测序分析。

    (2)工程菌工作种子库的检定
    除外基因表达盒序列分析,其它检定内容按上述工程菌主种子细胞库的检定。
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ytxsz

银虫 (初入文坛)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
药典中主种子批和工作种子批的菌种(例如酵母菌)鉴定给出五项鉴定项目
1.划种平板
2.染色镜检
3.筛选标志检查
4.表达量
5.基因稳定性
2楼2011-01-31 16:14:20
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四川-游戏

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
同求?有没有做过的,发一份方法操作吗
今天的事今天做
3楼2017-08-04 11:07:54
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fkem

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您好,请问您后来怎么做的RAPD的,求分享
4楼2018-10-31 14:00:48
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