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jia1012428

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请问哪位懂硫铵沉淀,给点经验! 已有6人参与

请问哪位懂硫铵沉淀,给点经验,我想将酵母发酵上清液中的蛋白沉淀,请问要用多大浓度的硫酸铵,多谢!
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 22:20:08
每个管子里面取10mL,取10个管子,然后从饱和度10%加到100%。跑个电泳看看从哪个开始上清里面没有目的蛋白了,再在那个浓度左右波动一点细化一下就OK了。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
5楼2010-12-29 21:49:45
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查看全部 7 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 22:19:39
不是说酵母发酵上清液中的所有蛋白沉淀条件都一样的,跟你要的蛋白的性质有关系的,浓度越高,沉淀的越多,但是其他不要的杂蛋白也沉淀下来了,要让你要的蛋白尽量沉淀,杂蛋白越少的方法就是尝试不同浓度。
2楼2010-12-29 20:50:34
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wangdan66322

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by jia1012428 at 2010-12-29 20:24:56:
请问哪位懂硫铵沉淀,给点经验,我想将酵母发酵上清液中的蛋白沉淀,请问要用多大浓度的硫酸铵,多谢!

这个不知道啊
请允许我尘埃落定用沉默埋葬了过去满身风雨我从海上来才隐居在这沙漠里
3楼2010-12-29 20:55:21
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天龙n部

金虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+1):鼓励积极参与~~~ 2010-12-29 22:20:02
这个你要做预实验才能确定,当然你先要大致知道你目标蛋白的PI等
4楼2010-12-29 21:41:19
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