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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】mRNA与阅读框
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paulajjh

木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】mRNA与阅读框

如题，我要克隆一段基因，NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA，阅读框一致，但就是前后各分别带有不同长度的基因片段，请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了，还是上下游基因还需要？谢谢
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1楼2010-12-25 10:16:07
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列，连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50
dhd997(金币+2):good 2010-12-25 13:35:51
如果你直接克隆到载体上表达，只需要从起始密码子到终止密码子的编码序列，上下游基因不需要，用于表达的元件表达载体上都有的。
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2楼2010-12-25 10:43:25
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rioarsenal

金虫 (正式写手)
★
paulajjh(金币+1): 2010-12-25 10:59:14
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:18
引用回帖:
Originally posted by paulajjh at 2010-12-25 10:16:07:
如题，我要克隆一段基因，NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA，阅读框一致，但就是前后各分别带有不同长度的基因片段，请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了，还是上下游基因还需要？谢谢

一楼正解，只需要CDS即可。
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3楼2010-12-25 10:45:42
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:32
paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢，还是其对应的cDNA？我有点晕了 2010-12-25 19:46:28
paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列，连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50

可以，直接告诉公司你要合成什么基因就好了
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4楼2010-12-25 13:32:17
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
paulajjh(金币+1):合成基因就是双链啊，但我不确定这样会不会不表达 2010-12-25 20:51:02
paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢，还是其对应的cDNA？我有点晕了 2010-12-25 19:46:28

绝大多数情况下是合成DNA双链……才有可能连入质粒，对不？
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6楼2010-12-25 19:58:34
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
paulajjh(金币+1):合成基因就是双链啊，但我不确定这样会不会不表达 2010-12-25 20:51:02

合成出来的DNA跟PCR获得的有本质上的区别吗？
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7楼2010-12-25 21:37:56
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paulajjh

木虫 (著名写手)
我不懂啊
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8楼2010-12-25 22:38:50
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tfang5楼
2010-12-25 13:55   回复  
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