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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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paulajjh

木虫 (著名写手)


[交流] 【求助/交流】mRNA与阅读框

如题,我要克隆一段基因,NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA,阅读框一致,但就是前后各分别带有不同长度的基因片段,请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了,还是上下游基因还需要?谢谢
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★ ★
paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列,连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50
dhd997(金币+2):good 2010-12-25 13:35:51
如果你直接克隆到载体上表达,只需要从起始密码子到终止密码子的编码序列,上下游基因不需要,用于表达的元件表达载体上都有的。
2楼2010-12-25 10:43:25
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rioarsenal

金虫 (正式写手)



paulajjh(金币+1): 2010-12-25 10:59:14
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:18
引用回帖:
Originally posted by paulajjh at 2010-12-25 10:16:07:
如题,我要克隆一段基因,NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA,阅读框一致,但就是前后各分别带有不同长度的基因片段,请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了,还是上下游基因还需要?谢谢

一楼正解,只需要CDS即可。
3楼2010-12-25 10:45:42
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dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:32
paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢,还是其对应的cDNA?我有点晕了 2010-12-25 19:46:28
paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列,连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50

可以,直接告诉公司你要合成什么基因就好了
4楼2010-12-25 13:32:17
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paulajjh(金币+1):合成基因就是双链啊,但我不确定这样会不会不表达 2010-12-25 20:51:02
paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢,还是其对应的cDNA?我有点晕了 2010-12-25 19:46:28

绝大多数情况下是合成DNA双链……才有可能连入质粒,对不?
6楼2010-12-25 19:58:34
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paulajjh(金币+1):合成基因就是双链啊,但我不确定这样会不会不表达 2010-12-25 20:51:02

合成出来的DNA跟PCR获得的有本质上的区别吗?
7楼2010-12-25 21:37:56
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paulajjh

木虫 (著名写手)


我不懂啊
8楼2010-12-25 22:38:50
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简单回复
tfang5楼
2010-12-25 13:55   回复  
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