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paulajjh

木虫 (著名写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 2157.6
帖子: 1073
在线: 89.4小时
虫号: 552104

[交流] 【求助/交流】mRNA与阅读框

如题，我要克隆一段基因，NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA，阅读框一致，但就是前后各分别带有不同长度的基因片段，请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了，还是上下游基因还需要？谢谢

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1楼 2010-12-25 10:16:07

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

★
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:32
paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢，还是其对应的cDNA？我有点晕了 2010-12-25 19:46:28

paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列，连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50

可以，直接告诉公司你要合成什么基因就好了

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4楼2010-12-25 13:32:17

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查看全部 8 个回答

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

★ ★
paulajjh(金币+3):那我直接全基因合成mRNA的阅读框序列，连到载体上就可以对吗 2010-12-25 10:58:50
dhd997(金币+2):good 2010-12-25 13:35:51

如果你直接克隆到载体上表达，只需要从起始密码子到终止密码子的编码序列，上下游基因不需要，用于表达的元件表达载体上都有的。

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2楼2010-12-25 10:43:25

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rioarsenal

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 1169059

★
paulajjh(金币+1): 2010-12-25 10:59:14
dhd997(金币+1):谢谢交流 2010-12-25 13:36:18

引用回帖:

Originally posted by paulajjh at 2010-12-25 10:16:07:
如题，我要克隆一段基因，NCBI上关于这段基因好几个报道的mRNA，阅读框一致，但就是前后各分别带有不同长度的基因片段，请问我克隆的时候是只需要阅读框就可以了，还是上下游基因还需要？谢谢

一楼正解，只需要CDS即可。

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3楼2010-12-25 10:45:42

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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

paulajjh(金币+1):合成基因就是双链啊，但我不确定这样会不会不表达 2010-12-25 20:51:02

paulajjh(金币+2):我全基因合成是mRNA呢，还是其对应的cDNA？我有点晕了 2010-12-25 19:46:28

绝大多数情况下是合成DNA双链……才有可能连入质粒，对不？

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6楼2010-12-25 19:58:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

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