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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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westlover

银虫 (著名写手)


[交流] 【求助】细胞培养中金属圆片试样的尺寸小于培养板孔径尺寸怎么办?

打算做细胞试验,但是培养板孔径尺寸比试样大,试样放进去后留有很大的间隙,教授说,细胞会自动选择位置较低的地方聚集,也就是说,细胞会慢慢迁移到间隙中去,那样的话,细胞附着、细胞增殖的数据就不准了,怎么办呢?
培养板是标准24孔,孔径不能变小,金属试样是委托企业加工的,也不好改尺寸,请问大家有什么好办法吗?
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)



shileinjut(金币+1):谢谢参与! 2010-12-25 00:39:46
westlover(金币+3): 2010-12-28 10:27:48
引用回帖:
Originally posted by westlover at 2010-12-24 15:46:05:


谢谢!我打算用鼠MC3T3-E1细胞,一种osteblast-like细胞,是贴壁细胞。我们的试样厚度是1.0mm。
呵呵,我仔细问了下教授,他真正担心的是,培养板的细胞附着性能很好,如果将悬浮液直接注入孔中,大量的细胞 ...

如果只是担心这个的话,问题不大,正常操作就行,0.6mm的缝隙没有什么关系
当然如果按照你上面提到的方法我相信没有问题
7楼2010-12-24 21:30:35
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firebolt

铁杆木虫 (著名写手)



westlover(金币+5):谢谢。 2010-12-24 09:53:45
shileinjut(金币+1):谢谢参与! 2010-12-24 12:07:00
问题不大,我们做凝胶上细胞增值的时候试样也是要比孔板小一些的,你可以等细胞贴壁之后将试样转移到新的孔里,48孔板能放进你的试样吗
2楼2010-12-24 08:53:25
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westlover

银虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2010-12-24 08:53:25:
问题不大,我们做凝胶上细胞增值的时候试样也是要比孔板小一些的,你可以等细胞贴壁之后将试样转移到新的孔里,48孔板能放进你的试样吗

试样的直径是15mm,24孔的孔径是15.6mm,48孔的板子孔径就太小了。
也就是说,种植的时候细胞悬浮液的浓度要尽量大,液滴要尽量小是吗?
要等多长时间才能转移到新孔里呢?
此外,我要测量种植1小时、3小时、7小时后的贴壁数量,如果那样的操作的话,是不是就不行啦?
3楼2010-12-24 09:57:49
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westlover

银虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by firebolt at 2010-12-24 08:53:25:
问题不大,我们做凝胶上细胞增值的时候试样也是要比孔板小一些的,你可以等细胞贴壁之后将试样转移到新的孔里,48孔板能放进你的试样吗

有个实验室的办法是:提高悬浮液的细胞浓度,保证每孔种植细胞数量的前提下,先滴在试样中心滴大概70μL悬浮液,这样,悬浮液会完全覆盖试样,但不会流出去。在CO2培养箱中静置30分钟后,再向孔中加入930μL培养液。他们一直使用这种方法,不知可取不?

[ Last edited by westlover on 2010-12-24 at 12:53 ]
4楼2010-12-24 12:48:06
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