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[交流]
【求助】细胞培养中金属圆片试样的尺寸小于培养板孔径尺寸怎么办？
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打算做细胞试验，但是培养板孔径尺寸比试样大，试样放进去后留有很大的间隙，教授说，细胞会自动选择位置较低的地方聚集，也就是说，细胞会慢慢迁移到间隙中去，那样的话，细胞附着、细胞增殖的数据就不准了，怎么办呢？ 培养板是标准24孔，孔径不能变小，金属试样是委托企业加工的，也不好改尺寸，请问大家有什么好办法吗？ |
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2楼2010-12-24 08:53:25
3楼2010-12-24 09:57:49
4楼2010-12-24 12:48:06
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westlover(金币+5):谢谢！ 2010-12-24 15:40:46
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-24 17:32:48
westlover(金币+5):谢谢！ 2010-12-24 15:40:46
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！ 2010-12-24 17:32:48
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不知道你用的是什么细胞，大部分贴壁细胞会不在贴壁后1-7小时迁移太多如果你的样品有一定厚度，对细胞来说从样品上下来就更困难了。 这样做，先把细胞悬液配好，浓度即为培养细胞浓度。24孔板每孔1ml缓缓加入即可 不同细胞贴壁时间差异很大。细胞一般在贴壁后若干小时开始细胞周期。你可以先试试看，种在dish里隔半个小时观察一下，会看到悬浮〉下沉〉贴壁开始（圆形）〉完全贴壁〉伪足伸出。测试细胞周期就需要首先对其同步化，分不同时间点收集数据。 |
5楼2010-12-24 14:50:07
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谢谢！我打算用鼠MC3T3-E1细胞，一种osteblast-like细胞，是贴壁细胞。我们的试样厚度是1.0mm。 呵呵，我仔细问了下教授，他真正担心的是，培养板的细胞附着性能很好，如果将悬浮液直接注入孔中，大量的细胞会附着在孔壁而不是试样上……，他的担心是不是多余的？我没有发现任何文章讨论间隙以及培养板孔壁吸引细胞的问题的，不过大部分文章都没有给出细胞种植的细节。 上面我提到的那个“droplet”方法有可行性吗？那么多细胞，那么少的培养液体积，密度太高了吧，细胞会不会死掉？ [ Last edited by westlover on 2010-12-24 at 15:54 ] |
6楼2010-12-24 15:46:05
7楼2010-12-24 21:30:35
8楼2010-12-24 23:31:37
9楼2010-12-25 06:56:06
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