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未曾走过的路

新虫 (初入文坛)


[交流] 【求助/交流】【求助】细菌未知功能基因的克隆方法

各位达人,请教问题如下:

化合物A在WT菌株中的代谢途径是A->B->C.
在化学诱变株Mut中B->C的相关gene被阻断,有可能是调节gene,也有可能是功能gene。

其中化合物ABC已知,但只有A能买得到。
A->B的gene已知,B->C的功能gene未知。
WT菌株基因组未测序~(貌似花钱比较多)

请问有什么好的方法,克隆B-C的功能gene呢?
方法原理是什么?实验难度如何?可行性有多高?经费需求多少?

小弟金币不多,倾情奉献~
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zhuifeng7000

至尊木虫 (著名写手)


★ ★ ★ ★
看天(金币+1):鼓励回答 2010-12-13 12:22:31
scelab(金币+3):谢谢交流~ 2010-12-13 12:23:35
未曾走过的路(金币+1):谢谢你 2010-12-13 20:35:57
看B->C是由什么酶催化的,然后到与你的菌株亲缘比较近的基因组测过序的菌株中查找这个酶的编码基因,然后再通过这个基因设定兼并因为在你的菌株中PCR扩增,可能会得到这个基因。
2楼2010-12-13 11:48:59
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