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【求助/交流】AnnexinV/PI双染检测凋亡细胞，结果“诡异”，求帮助！
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最近在做AnnexinV/PI双染检测凋亡细胞，用的是凯基生物的AnnexinV/PI试剂盒，细胞给药24小时后，有70%都变圆收缩，还有20-30%都漂了起来，但是用流式检测凋亡的结果却只有百分之几而已，请高手帮我解答下这是为什么啊？ PS:本人之前还做了hochest33342和DNA Ladder，结果都显示我的药是有促凋亡作用的。 |
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 细胞实验操作 | 流式 |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
richenim(金币+5): 2010-12-10 11:39:54
dhd997(金币+2):good 2010-12-10 14:36:59
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richenim(金币+5): 2010-12-10 11:39:54
dhd997(金币+2):good 2010-12-10 14:36:59
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如果你确定是有凋亡，那么我觉得应该是你制备的问题 这是我们实验室的制备方法 流式细胞术双染测凋亡的样品制备 1、 将各组细胞的培养基移入15ml离心管，加终浓度为2%的BSA。 2、 用胰酶消化细胞，吸除胰酶，加原培养基小心吹打成单细胞。 3、 1500rpm离心5min，弃尽上清。用室温平衡的PBS 1ml重悬细胞，小心吹打。 另外，你的细胞数也太少了吧，才刚刚好4次方的细胞，做流式一般要5次方个细胞才可信（当然有可能是按百分之多少显示） |
7楼2010-12-10 11:24:51
2楼2010-12-10 10:35:38
3楼2010-12-10 11:06:36
4楼2010-12-10 11:09:37
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